臨床醫(yī)學檢驗技士考試:《答疑周刊》2023年第30期
問題索引:
1.【問題】免疫比濁法對抗體的要求有哪些?
2.【問題】PCR實驗室的污染來源有哪些?
3.【問題】肝功能嚴重受損時,清蛋白/球蛋白比例應該是增高還是降低?
具體解答:
1.【問題】免疫比濁法對抗體的要求有哪些?
【解答】免疫比濁測定法要求抗體的特異性強、效價高、親和力強,并使用R型抗體。
(1)抗體的特異性。
(2)抗體的效價。
(3)抗體的親和力:親和力是指抗體和抗原結(jié)合[醫(yī)學教育網(wǎng)原創(chuàng)]的牢固程度。親和力強則抗體的活性高,不僅可以加快抗原抗體反應的速度,而且形成的IC較牢固,不易發(fā)生解離,這在速率比濁法中尤為重要。
(4)R型和H型抗體:根據(jù)抗血清來源的動物種類不同,分為R型抗體和H型抗體。R型抗體是指以家兔為代表的小型動物被注射抗原免疫后制備的抗血清。這類抗血清的特點是親和力較強,抗原抗體結(jié)合后不易發(fā)生解離,H型抗體是指以馬為代表的大型動物注射抗原后制備的抗血清,這類抗血清的親和力弱,抗原抗體結(jié)合后極易解離。
2.【問題】PCR實驗室的污染來源有哪些?
【解答】①樣本間交叉污染:收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴外溢;不同樣本移液時忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖;移液器等實驗器具及耗材未及時消毒滅菌;不同樣本同時開蓋或樣本劇烈震蕩、反復吹吸導致氣溶膠形成擴散,相互交叉污染。
②實驗試劑污染:主要是在PCR組分試劑加[醫(yī)學教育網(wǎng)原創(chuàng)]樣過程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。加樣過程中,因為PCR試劑對溫度十分敏感,需要通過冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于OC,但這個過程也是充滿了污染的風險的。
③擴增產(chǎn)物污染:大量拷貝的產(chǎn)物泄[醫(yī)學教育網(wǎng)原創(chuàng)]漏或擴增后的PCR反應管意外開蓋,這是PCR反應中最主要最常見的污染問題。因為PCR產(chǎn)物拷貝量大,遠遠高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,就可形成假陽性。
④克隆質(zhì)粒污染:作為陽性質(zhì)控品的克隆質(zhì)粒外溢。
3.【問題】肝功能嚴重受損時,清蛋白/球蛋白比例應該是增高還是降低?
【解答】隨病情加重而出現(xiàn)A/G比值倒置,此時提示肝功能嚴重損害。A/G的參考值為:1.0~2.0:1。A/G比值倒置就是指的是A(清蛋白)降低,G(球蛋白)升高。所以肝功能嚴重受損時,清蛋白/球蛋白比例是減低的。
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