網(wǎng)織細(xì)胞計(jì)數(shù)的操作方法
網(wǎng)織細(xì)胞計(jì)數(shù)的操作方法,快來(lái)跟著小編了解一下吧!
1.顯微鏡試管法操作
(1)加染液:于試管中加入10g/L煌焦油藍(lán)生理鹽水溶液2滴,再加新鮮血2滴,立即混勻,置37℃下15~20min。
(2)制片:取1小滴制成薄血涂片,自然干燥。
(3)觀察:在低倍鏡下選擇紅細(xì)胞分布均勻的部位進(jìn)行觀察。
(4)計(jì)數(shù):在油鏡下計(jì)數(shù)至少1000個(gè)紅細(xì)胞中網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)。
(5)計(jì)算:
網(wǎng)織紅細(xì)胞分?jǐn)?shù)=(計(jì)數(shù)的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù))/1O00,
網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值(×109/L)=紅細(xì)胞數(shù)×1012/L×網(wǎng)織紅細(xì)胞分?jǐn)?shù)。
2.顯微鏡法注意事項(xiàng)
(1)網(wǎng)織紅細(xì)胞必須活體染色,WH0推薦使用新亞甲藍(lán)染液,其染色力強(qiáng)且穩(wěn)定?;徒褂退{(lán)染液操作簡(jiǎn)單、費(fèi)用低廉,但易產(chǎn)生沉淀、工作效率不高、精度差。染液與血液比例以1:1為宜,嚴(yán)重貧血時(shí),可適量增加血量。
(2)為提高網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)精度和速度,ICSH推薦使用Miller窺盤(pán),方法是將Miller窺盤(pán)置于目鏡內(nèi),選擇紅細(xì)胞散在且分布均勻的部位。
(3)用小方格(A)計(jì)數(shù)紅細(xì)胞,大方格(B)計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞,按下式計(jì)算:
(4)注意鑒別網(wǎng)織紅細(xì)胞與HbH包涵體。Ret為藍(lán)綠色網(wǎng)狀或點(diǎn)粒狀物質(zhì),分布不均,HbH包涵體為藍(lán)綠色圓形小體,均勻散布于整個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)。
【方法學(xué)評(píng)價(jià)】
1.普通光學(xué)顯微鏡法
試管法操作簡(jiǎn)便、重復(fù)性較好。玻片法取血量少、染色時(shí)水分易蒸發(fā),造成結(jié)果偏低。但顯微鏡法受主觀因素影響較多,且耗時(shí)費(fèi)力。
2.網(wǎng)織細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法
可客觀地將Ret分成高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞(HFR)、中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞(MFR)、低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞(LFR)3類(lèi),有助于化療、放療、移植患者的監(jiān)測(cè)。
3.血液分析儀法
網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值(Ret)、網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比(Ret%)、網(wǎng)織紅細(xì)胞分布寬度(RDWr)、網(wǎng)織紅細(xì)胞平均體積(MCVr/MRV)、網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(HCr)、網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHCr)、網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白分布寬度(HDWr)、LFR、MFR、HFR、網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟指數(shù)(RMI,RMI=(MFR+HFR)/LFR×100)。
儀器法優(yōu)點(diǎn)是測(cè)量細(xì)胞多,避免主觀因素,方法易于標(biāo)準(zhǔn)化。
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