抗球蛋白法配血法的注意事項(xiàng)
抗球蛋白法配血法:又稱Coombs試驗(yàn)。是最可靠的確定不完全抗體的方法,但操作繁瑣。抗球蛋白法配血法是最早用于檢查不完全抗體的方法。
直接抗球蛋白法可檢查受檢者紅細(xì)胞是否已被不完全抗體致敏;間接抗球蛋白法可用于鑒定Rh血型及血清中是否存在不完全抗體。本法雖較靈敏,但也有一定限度,且操作復(fù)雜,不利于急診檢查和血庫的大批量工作。
試劑:抗球蛋白試劑盒:包括抗廣譜、抗C3、抗IgG 3種試劑。陽性對照:IgG型抗D致敏5%RhD陽性紅細(xì)胞生理鹽水懸液。陰性對照:正常人5%紅細(xì)胞生理鹽水懸液。
注意事項(xiàng):①標(biāo)本采集后應(yīng)立即進(jìn)行試驗(yàn),延遲試驗(yàn)或中途停止可使抗體從細(xì)胞上丟失。②抗人球蛋白血清應(yīng)按說明書最適稀釋度使用,否則可產(chǎn)生前帶或后帶現(xiàn)象而誤為陰性結(jié)果。③陰性對照凝集:可能是抗人球蛋白血清處理不當(dāng),仍有殘存的種屬抗體,或被細(xì)菌污染,應(yīng)更換血清重做試驗(yàn)。核實(shí)陰性結(jié)果方法:在該試管中加1滴IgG致敏紅細(xì)胞,如結(jié)果為陽性,則表示試管內(nèi)的抗球蛋白血清未被消耗,陰性結(jié)果可靠。④陽性對照不凝集:可能是抗人球蛋白血清或用于致敏紅細(xì)胞的不完全抗D血清失效,或紅細(xì)胞未洗凈帶人球蛋白所致,應(yīng)更換血清或洗凈紅細(xì)胞后重做。⑤如需了解體內(nèi)致敏紅細(xì)胞的免疫球蛋白的類型,則可分別以抗IgG、抗IgM或抗C3單價(jià)抗球蛋白血清進(jìn)行試驗(yàn)。
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