生物素標記蛋白質(zhì)的標記方法和注意事項，跟著小編來學(xué)習(xí)一下吧！

標記方法

1.標記抗體、抗原：由于一個抗體分子可連接多個生物素分子，因此一個生物素化的抗體分子在反應(yīng)時可與多個親和素分子結(jié)合。通常選用第二抗體進行生物素標記，制備的標記物具有通用性。

2.標記酶：如生物素標記辣根過氧化物酶（HRP）。

標記注意事項

1.應(yīng)根據(jù)抗原或抗體分子結(jié)構(gòu)中所帶可標記基團的種類（氨基、醛基或巰基）以及分子的理化性質(zhì)（酸性、中性或堿性），選擇相應(yīng)的活化生物素和反應(yīng)條件。

2.標記反應(yīng)時，活化生物素與待標記抗原或抗體應(yīng)有適當?shù)谋壤?，使每個蛋白質(zhì)分子上標記的生物素分子數(shù)量控制在一定范圍，以免影響標記物的活性。

3.為減少生物素標記蛋白質(zhì)后，大分子物質(zhì)造成的空間位阻影響，有利于生物素與親和素的結(jié)合，可在生物素與被標記物間加入交聯(lián)臂樣結(jié)構(gòu)。

4.生物素與抗原、抗體等蛋白質(zhì)結(jié)合后，不影響后者的免疫活性；標記酶時則結(jié)果有不同。

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