免疫標記電鏡技術(shù)標本制備的要求有哪些
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為保持組織的抗原性,固定劑不宜過強。
1.包埋前染色 優(yōu)點是切片染色前不經(jīng)過鋨酸固定、脫水及樹脂包埋等過程,抗原未被破壞,易于獲得良好的免疫反應(yīng)。特別適用于含抗原量較少的組織。
2.包埋后染色 優(yōu)點是超微結(jié)構(gòu)保存較好,方法簡便,陽性結(jié)構(gòu)有高度的可重復(fù)性,能在同一張切片上進行多重免疫染色。但抗原活性可能減弱,甚至喪失或者抗原性質(zhì)發(fā)生改變。
3.超薄切片免疫染色 是將組織置于2.3mol/L蔗糖液中,以液氮速凍,冷凍切片。由于不需經(jīng)固定、脫水、包埋等步驟,直接進行免疫染色,所以抗原性保存較好,兼有包埋前和包埋后染色的優(yōu)點。
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