免疫測定——流式細胞分析法，主要用于那種情況的檢驗?zāi)?？快來跟著小編了解一下吧?/p>

主要用于細胞內(nèi)細胞因子和細胞表面黏附分子的檢測，通過特異性的熒光抗體染色，能簡單、快速地進行檢測，精確判斷不同細胞亞群的細胞因子和膜分子的表達情況。根據(jù)熒光抗體的性質(zhì)，熒光抗體染色分直接法和間接法。直接法較為常用，其敏感性雖不及間接法，但特異性強。

可區(qū)分具有不同分泌特性的細胞亞群，如Th1、Th2細胞等。

檢測細胞內(nèi)細胞因子時，主要包括以下基本步驟：

1.分離和培養(yǎng)待檢細胞。

2.細胞固定：常用的細胞固定劑為4%多聚甲醛。

3.封閉非特異性結(jié)合位點：即用含5%脫脂奶粉和鈣、鎂離子的PBS溶液，重懸已固定的細胞。

4.染色與分析：即用熒光素標記的細胞因子特異性單克隆抗體做熒光抗體染色，用流式細胞儀分析熒光陽性細胞百分比和熒光強度。此外，若應(yīng)用不同熒光素標記兩種以上細胞因子的單克隆抗體，則可同時檢測同一細胞內(nèi)2種以上不同的細胞因子。

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