生物素標記蛋白質(zhì)的方法及標記注意
標記方法:
(1)標記抗體、抗原:常用于標記抗體的活化生物是BNHS;對于偏酸性的抗原,標記時多采用BHZ;
(2)標記酶:以生物素標記HRP為例。
標記注意事項:
(1)應(yīng)根據(jù)抗原或抗體分子結(jié)構(gòu)中所帶可標記基團的種類以及分子的理化性質(zhì),選擇相應(yīng)的活化生物素和反應(yīng)條件;
(2)標記反應(yīng)時,活化生物素與待標記抗原或抗體應(yīng)有適當(dāng)?shù)谋壤?/p>
(3)為減少空間位阻影響,可在生物素與被標記物之間加入交聯(lián)臂樣結(jié)構(gòu);
(4)生物素與抗原、抗體等蛋白質(zhì)結(jié)合后,不影響后者的免疫活性;標記酶時則結(jié)果有不同。
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