1.電解質(zhì)：抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合后，雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體，若溶液中無電解質(zhì)參加，仍不出現(xiàn)可見反應(yīng)。為了促成沉淀物或凝集物的形成，常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。

2.酸堿度：抗原抗體反應(yīng)必須在合適的pH環(huán)境中進行。蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì)，因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點?？乖贵w反應(yīng)一般在pH6～9進行，有補體參與的反應(yīng)pH為7.2～7.4，pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應(yīng)。

3.溫度：在一定范圍內(nèi)，溫度升高可加速分子運動，抗原與抗體碰撞機會增多，使反應(yīng)加速。一般為15℃～40℃，常用的抗原抗體反應(yīng)溫度為37℃，溫度如高于56℃，可導致已結(jié)合的抗原抗體再解離，甚至變性或破壞。每種試驗都有其獨特的最適反應(yīng)溫度要求。此外，適當振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸，加速反應(yīng)。