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瑞特(Wright)染色法

2015-10-10 09:17 來源:
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瑞特(Wright)染色法:為發(fā)觀察細胞內部結構,識別各種細胞及其異常變化,血涂片必須嘲行染色。血涂片的各種染色方法大多是羅氏染色法衍變來的。目前常用瑞特染色法。

(1)瑞特染料是由酸性染料伊紅和堿性染料亞甲藍組成有復合染料。亞甲藍為四甲基硫堇染料,有對醌型和鄰醌型兩種結構。通常為氯鹽,即氯化美藍。美藍容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級染料。市售美藍中部分已被氧化為天青。伊紅通常為鈉鹽。即伊紅和伊混合后,產生一種憎液性膠體伊紅美藍中性沉淀,即瑞特染料。

(2)細胞的染色既有物理的吸附作用,又有化學的親和作用,各種細胞成分化學性質不同,對各種染料的親和力也不一樣。因此,用本染料液染色后,在同一血片上,可以看到各種不同的色彩,例如血紅蛋白,嗜酸性顆粒為堿性蛋白質,與酸性染料伊紅結果,染粉紅色,稱為嗜酸性物質;細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍或天青結合,染紫藍色,稱為嗜堿性物質;中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍均可結合,染淡紫色,稱為中性物質。

(3)PH對細胞染色有影響。細胞各種成分均不蛋白質,由于蛋白質系兩性電解質,所帶電荷隨溶液PH而定,在偏酸性環(huán)境中下在電荷增多,易與伊紅結合,染色偏紅;在偏三性環(huán)境中負電荷增多,醫(yī)學|教育網(wǎng)搜集整理易與美藍或天青結合,染色偏藍。因此細胞染色對氫離子濃度十分敏感,染色用正經片必須清潔,無酸堿污染。配制頊特液必須用優(yōu)質甲醇,稀釋染色必須用緩沖液,沖洗用水應近中性,否則可導致各種細胞染色反應異常,以致識別困難,甚至造成錯誤。

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