醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編整理了“循環(huán)免疫復(fù)合物檢測(cè)法”相關(guān)知識(shí)供大家參考學(xué)習(xí)，希望對(duì)大家有所幫助！

（一）物理測(cè)定法

1.聚乙二醇法

聚乙二醇（PEG）是乙二醇聚合而成的無(wú)電荷形多糖分子，分子量變化范圍較大，常用的分子量是6000.用3%～4%濃度的PEG可以選擇性地將大分子免疫復(fù)合物沉淀下來(lái)，其作用機(jī)制尚不甚清楚。將PEG溶液與待檢血清混合，置4℃冰箱過(guò)夜后離心，將沉淀物用PEG溶液充分洗滌，重新溶解于0.01mol/L的NaOH中，在波長(zhǎng)280nm下測(cè)量溶液的吸光度；也可利用散射比濁法直接測(cè)定PEG沉淀的免疫復(fù)合物；以不同濃度的熱聚合IgG作為參考標(biāo)準(zhǔn)來(lái)計(jì)算CIC的含量。

聚乙二醇法簡(jiǎn)單易行，可在臨床工作中推廣。但此法易受多種大分子蛋白和溫度的干擾，特異性稍差。PEG法還特別適用于沉淀獲得CIC，再進(jìn)行解離分析其中的抗原與抗體。

2.冷球蛋白測(cè)定

在某些病理情況下，血清中的免疫復(fù)合物具有可逆性冷沉淀的特性，于4℃冰箱中放置1～3天可自發(fā)地沉淀下來(lái)；此種情況多見于冷球蛋白血癥，所涉及的抗原包括自身的IgG、IgM、核苷酸、腫瘤相關(guān)抗原、腎小管上皮、甲狀腺球蛋白、紅細(xì)胞基質(zhì)等，還有外源性抗原如乙肝病毒、EB病毒、巨細(xì)胞病毒、牛白蛋白和馬蛋白等。

（二）補(bǔ)體相關(guān)測(cè)定法

IgG和IgM類抗體與抗原結(jié)合后，重鏈CH2區(qū)的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)暴露，可以固定C1q并激活補(bǔ)體的系列反應(yīng)，這是利用補(bǔ)體有關(guān)技術(shù)檢測(cè)免疫復(fù)合物的基礎(chǔ)。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)|搜集整理

1.C1q結(jié)合試驗(yàn)將待檢血清先行加熱56℃30min,以滅活其中的補(bǔ)體和破壞已與CIC結(jié)合的C1q,空出補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)。CIC與C1q的結(jié)合可用多種方法進(jìn)行檢測(cè)，常用的有以下3種。

（1）液相法：先將同位素標(biāo)記的C1q與滅活過(guò)的血清標(biāo)本混合作用，再加入0.5%（終濃度）的PEG將結(jié)合了C1q的CIC沉淀下來(lái)，通過(guò)檢測(cè)沉淀物中的放射活性來(lái)計(jì)算CIC的含量。

（2）固相法：先將C1q吸附于固相載體表面，加入待檢血清使CIC與C1q結(jié)合，再加入同位標(biāo)記的或酶標(biāo)記的抗人IgG或SPA，最后檢測(cè)其放射活性或酶活性。

（3）C1q偏離試驗(yàn)：先將同位素標(biāo)記的C1q與滅活的血清標(biāo)本混合，再加抗體致敏的綿羊紅細(xì)胞，溫育后離心，檢測(cè)紅細(xì)胞上的放射活性。紅細(xì)胞的放射活性與免疫復(fù)合物的量呈負(fù)相關(guān)。

2.補(bǔ)體試驗(yàn)本法的原理類似補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。將一定量的補(bǔ)體（多為混合豚鼠血清）與滅活的待檢血清混合溫育，反應(yīng)后加入致敏綿羊紅細(xì)胞。如出現(xiàn)溶血表示血清中沒(méi)有CIC存在；不溶血說(shuō)明標(biāo)本中有CIC存在。將血清標(biāo)本做不同稀釋，并與已知的熱聚合IgG作對(duì)照，可以計(jì)算出CIC的含量。本方法的靈敏度較高，且易于在一般實(shí)驗(yàn)室開展，不足之處是特異性較差。