空斑形成細(xì)胞檢測方法:
是體外檢測B細(xì)胞功能的一種方法醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)|搜集整理。該法最早用于實(shí)驗(yàn)動物的PFC測定。是以SRBC作為抗原免疫小鼠,從免疫小鼠脾臟分離淋巴細(xì)胞或直接用脾細(xì)胞,將其與高濃度SRBC混合于瓊脂中,經(jīng)37℃,5%CO2溫育后,在補(bǔ)體參與下抗體形成細(xì)胞周圍的SRBC溶解而形成溶血小區(qū),即溶血空斑(plaque)。一個空斑代表一個抗體形成細(xì)胞,空斑的數(shù)量表示抗體形成細(xì)胞的多少。IgM參與本反應(yīng),固定補(bǔ)體能力強(qiáng),可直接激活傳統(tǒng)途徑,導(dǎo)致SRBC溶解,稱直接法。若檢測其他類別免疫球蛋白的抗體形成細(xì)胞,需在試驗(yàn)系統(tǒng)中加入相應(yīng)的第二抗體才能使SRBC溶解形成空斑,稱間接空斑形成試驗(yàn)。近年來,已應(yīng)用SPA致敏的SRBC結(jié)合抗人球蛋白來檢測人的抗體形成細(xì)胞,此法稱SPA-SRBC溶血空斑試驗(yàn)。在此檢測系統(tǒng)中加入抗人Ig,能與受檢細(xì)胞產(chǎn)生的Ig結(jié)合成復(fù)合物,并通過復(fù)合物中抗人IgFc段與致敏SRBC上的SPA結(jié)合,激活補(bǔ)體而使SRBC溶解。空斑形成細(xì)胞的檢測,有助于免疫應(yīng)答動力學(xué)的研究和探討藥物對機(jī)體免疫狀態(tài)的影響。是目前研究B細(xì)胞抗體產(chǎn)生功能的重要手段。