T細胞計數(shù)
(1)E花環(huán)法:人類T細胞表面有SRBC受體(CD2)能與SRBC結(jié)合形成玫瑰花環(huán)樣結(jié)構(gòu),將經(jīng)分層液分離現(xiàn)的RBM懸液與SRBC在含有血清的平衡鹽水中混合,經(jīng)37℃培養(yǎng)5~10分鐘放4℃過夜,取細胞懸計數(shù),外周血淋巴細胞中約70%~80%淋巴細胞結(jié)成花環(huán)即為T細胞。目前此方法已用來分離T細胞,而不用做T細胞計數(shù)。
(2)用單克隆抗體計數(shù)T細胞:將人的PBM分成三等份,分別用小鼠抗人CD3、CD4和CD8的單克隆抗體作第一抗體與細胞結(jié)合,再用FITC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG抗體作第二抗體進行間接免疫熒光染色醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理,在熒光顯微鏡下或流式細胞儀檢測結(jié)果,在PBM中被CD3抗體染上熒光的細胞稱為CD3+細胞即總T細胞。正常人在PBM中T細胞占70%~80%.正常人的CD4+細胞和CD8+細胞之和應(yīng)與CD3+細胞數(shù)一致。CD4+細胞與CD8+細胞的比值正常人約為2/1而艾滋病患者則比值小于1.7.
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