B細胞表面標志的檢測：

B細胞具有多種特異性抗原和受體，據此建立了相應的檢測方法，一般用以研究B細胞各分化發(fā)育階段的特性，也可藉以鑒定和計數各階段B細胞在人外周血和淋巴樣組織的分布以及疾病時的變化動態(tài)，為臨床提供診治相關疾病的有用信息。

一、B細胞表面抗原的檢測

B細胞表面有CD19、CD20、CD21、CD22和CD29等分化抗原，其中有些系全部B細胞所共有，而有些僅活化B細胞所特有，據此可用相應的CD系列單克隆抗體，通過間接熒光免疫法、酶免疫組化或ABC法加以檢測。健康成年人外周血CD20陽性細胞約占淋巴細胞總數的8％～12％。

二、B細胞受體的檢測

B細胞表面有膜免疫球蛋白（SmIg）、Fc受體、補體受體、EB病毒受體和小鼠紅細胞受體，其中以SmIg為B細胞所特有，是鑒定B細胞可靠的指標。

（一）SmIg的檢測

大多采用間接熒光免疫法或包括ABC法在內的酶免疫組化法，關鍵是選用高效價、高特異性和高和力的熒光或酶標記的多價抗人Ig抗體，也可分別用各種類型的Ig，即IgM、IgG、IgA、IgE等抗血清，檢測帶有各種類型Ig的B細胞，在人外周血中以帶有SmIgM的細胞數為最多。

B細胞經熒光標記的抗Ig抗體染色，細胞膜表面呈現的熒光著色可有不同的形式醫(yī)學|教育|網搜集整理，開始均勻分布呈環(huán)狀，其后集中在某些部位呈斑點狀，然后又可集在一個部位呈帽狀，最后可被吞飲入胞漿直至熒光消失。這一現象是由于淋巴細胞膜由雙層類脂組成，上嵌有蛋白分子，在體溫條件下，膜呈半液體狀，而鑲嵌物能在其中移動。當SmIg抗體發(fā)生結合時，由于抗血清為雙價，使SmIg出現交聯現象，這種抗原與抗體結合物可連成斑點和帽狀，時間過長，帽狀結合物可脫落或被吞飲而消失，因此染色后，觀察時間不能超過30min，或在染色時加疊氮鈉防止帽狀物形成或被吞飲。

（二）Fc受體和補體受體的檢測

B細胞表面具有與IgGFc段結合的受體，極易與抗原抗體復合物中抗體Fc段牢固結合，故用相應抗體致敏的紅細胞（EA）作批示物，在一定條件下，它能與帶Fc受體的B細胞形成EA花環(huán)，故稱EA花環(huán)試驗。而細胞表面的補體受體，則能與紅細胞（E）-抗紅細胞抗體（A）-補體（C）復合物（EAC）中的補體相結合，從而建立EAC花環(huán)試驗。但由于單核細胞、巨噬細胞、NK以及部分T細胞也帶有Fc或補體受體。因此形成EA和EAC花環(huán)并非B細胞所特有，加上該類試驗需制備新鮮指示物，操作麻煩，目前基本上已被其他試驗所取代，甚少應用。

（三）小鼠紅細胞受體的檢測

部分B細胞能與小鼠紅細胞形成花環(huán)，慢性B細胞白血病患者外周血淋巴形成小鼠紅細胞花環(huán)率高達60％～85％醫(yī)學|教育|網搜集整理，但健康人該花環(huán)率僅占總淋巴細胞的5％～10％，據此推知形成該花環(huán)的性能是某些B細胞亞群的標志，由于方法簡便，臨床可用作鑒定不同型淋巴細胞白血病。