臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試：《答疑周刊》2016年第36期：

問(wèn)題索引：

一、「問(wèn)題」什么是過(guò)氧化物酶染色？

二、「問(wèn)題」什么是中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色？

三、「問(wèn)題」什么是非特異性酯酶染色？

四、「問(wèn)題」什么是糖原染色？

具體解答：

一、「問(wèn)題」什么是過(guò)氧化物酶染色？

「解答」血細(xì)胞中的過(guò)氧化物酶（POX）能分解試劑中的底物H2O2，釋放出新生態(tài)氧，使無(wú)色聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色聯(lián)苯胺，后者與亞硝基鐵氰化鈉結(jié)合形成藍(lán)黑色的顆粒，沉著于細(xì)胞質(zhì)中。胞質(zhì)中無(wú)藍(lán)黑色顆粒者為陰性反應(yīng)，出現(xiàn)細(xì)小顆粒、分布稀疏者為弱陽(yáng)性反應(yīng)，顆粒粗大而密集者為強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)。主要用于急性白血病類(lèi)型的鑒別。急性粒細(xì)胞白血病時(shí)，白血病細(xì)胞多呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，急性單核細(xì)胞白血病時(shí)呈弱陽(yáng)性或陰性反應(yīng)，急性淋巴細(xì)胞白血病呈陰性反應(yīng)。

二、「問(wèn)題」什么是中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色？

「解答」堿性磷酸酶主要存在于成熟階段的中性粒細(xì)胞，其他細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。陽(yáng)性反應(yīng)為胞質(zhì)中出現(xiàn)灰色到棕黑色顆粒，反應(yīng)強(qiáng)度分為5級(jí)，即"-、1+、2+、3+、4+".反應(yīng)結(jié)果以陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞百分率和積分值來(lái)表現(xiàn)。血涂片染色后在油鏡下觀察100個(gè)成熟中性粒細(xì)胞，陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞所占百分率即為陽(yáng)性率。對(duì)所有陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞逐個(gè)按反應(yīng)程度分級(jí)，將各級(jí)所占的百分率乘以級(jí)數(shù)，然后相加，即為積分值。成人NAP陽(yáng)性率10-40%，積分值40-80分。由于各實(shí)驗(yàn)室條件不同，參考值也有差異。急性化膿性感染活性增高，病毒性感染時(shí)活性正?；驕p低；慢性粒細(xì)胞白血病活性明顯減低，積分值常為0，類(lèi)白血病反應(yīng)是活性極高；急性粒細(xì)胞白血病時(shí)積分值減低，急性淋巴細(xì)胞白血病積分值多增高，急性單核細(xì)胞白血病是一般正常或減低；再障時(shí)活性增高，PNH時(shí)活性減低。

三、「問(wèn)題」什么是非特異性酯酶染色？

「解答」α-醋酸萘酚酯酶又稱非特異性酯酶（NSE），能將基質(zhì)液中的α-醋酸萘酚水解，產(chǎn)生α-萘酚，再與重氮染料偶聯(lián)，形成不溶性的有色沉淀，定位于胞質(zhì)內(nèi)。胞質(zhì)中出現(xiàn)有色沉淀為陽(yáng)性反應(yīng)，此酶主要存在于單核系細(xì)胞中，原單核細(xì)胞為陰性反應(yīng)或弱陽(yáng)性反應(yīng)，由單核細(xì)胞和單核細(xì)胞為陽(yáng)性反應(yīng)，粒系細(xì)胞一般為陰性或弱陽(yáng)性反應(yīng)，淋巴細(xì)胞一般為陰性反應(yīng)。所以急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，但單核細(xì)胞中的酶活性可被氟化鈉抑制，故在進(jìn)行染色，常同時(shí)被氟化鈉抑制試驗(yàn)。急性粒細(xì)胞白血病是呈陰性反應(yīng)或弱陽(yáng)性反應(yīng)，但陽(yáng)性反應(yīng)不被氟化鈉抑制。

四、「問(wèn)題」什么是糖原染色？

「解答」糖原染色又稱過(guò)碘酸-Schiff反應(yīng)（PAS），過(guò)碘酸能將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化，生成醛基，醛基與Schiff液中的無(wú)色品紅結(jié)合，形成紫紅色化合物，定位于胞質(zhì)內(nèi)。胞質(zhì)中出現(xiàn)紅色者為陽(yáng)性反應(yīng)，陽(yáng)性反應(yīng)物可呈顆粒狀、小塊狀或彌漫均勻紅色。PAS的陽(yáng)性程度通常以強(qiáng)陽(yáng)性、陽(yáng)性、弱陽(yáng)性和陰性來(lái)表示。也有用陽(yáng)性百分率和積分值來(lái)表示。紅血病或紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)；急性粒細(xì)胞白血病時(shí)，原粒細(xì)胞成陰性或弱陽(yáng)性反應(yīng)，陽(yáng)性反應(yīng)物質(zhì)呈細(xì)顆粒狀或均勻淡紅色；急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)，原淋和幼淋細(xì)胞常呈陽(yáng)性反應(yīng)，陽(yáng)性反應(yīng)物質(zhì)呈粗顆粒狀或塊狀；急性單核細(xì)胞白血病，原單核細(xì)胞大多為陽(yáng)性反應(yīng)，呈彌漫均勻紅色或細(xì)顆粒狀。

「例題」男性，25歲，發(fā)熱，牙齦出血，皮膚瘀斑5天，胸骨壓痛明顯，肝脾肋下觸及，血紅蛋白70g/L，白細(xì)胞50×109/L，血小板20×109/L，骨髓：原始細(xì)胞0.90， POX（+），PAS陰性，非特異性酯酶陰性，診斷為

A. 急性粒細(xì)胞白細(xì)胞

B. 急性早幼粒細(xì)胞白血病

C. 急性單核細(xì)胞白血病

D. 急性淋巴細(xì)胞白血病

E. 急性紅白血病

「正確答案」A

「解析」細(xì)胞化學(xué)染色

⑴過(guò)氧化物酶：急淋細(xì)胞呈陰性（陽(yáng)性＜3％）；急粒細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性；急單細(xì)胞呈陽(yáng)性或弱陽(yáng)性。

⑵糖原染色：急淋細(xì)胞呈陽(yáng)性（粗顆?；虼謮K狀，常集于胞漿一側(cè)）；急粒、急單細(xì)胞呈弱陽(yáng)性（彌散性細(xì)顆粒狀）；紅白血病：幼紅細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性。

⑶非特異性酯酶染色：急單細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性，能被氟化鈉明顯抑制（>50％）；急粒細(xì)胞呈陽(yáng)性或弱陽(yáng)性，氟化鈉輕度抑制（＜50％）；急淋細(xì)胞一般呈陰性。

⑷中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色：急淋白血病積分增高或正常；急粒白血病明顯減低；急單白血病可增高或減低。

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