為方便廣大考生復(fù)習(xí),醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理了臨床醫(yī)學(xué)檢驗技士考試關(guān)于B細胞功能的檢測的相關(guān)內(nèi)容,以供參考。
1.空斑形成細胞(PFC)
檢測是體外檢測B細胞功能的一種方法。該法最早用于實驗動物的PFC測定。是以SRBC作為抗原免疫小鼠,從免疫小鼠脾臟分離淋巴細胞或直接用脾細胞,將其與高濃度SRBC混合于瓊脂中,經(jīng)37℃,5%CO2溫育后,在補體參與下抗體形成細胞周圍的SRBC溶解而形成溶血小區(qū),即溶血空斑(plaque)。一個空斑代表一個抗體形成細胞,空斑的數(shù)量表示抗體形成細胞的多少。IgM參與本反應(yīng),固定補體能力強,可直接激活傳統(tǒng)途徑,導(dǎo)致SRBC溶解,稱直接法。若檢測其他類別免疫球蛋白的抗體形成細胞,需在試驗系統(tǒng)中加入相應(yīng)的第二抗體才能使SRBC溶解形成空斑,稱間接空斑形成試驗。近年來,已應(yīng)用SPA致敏的SRBC結(jié)合抗人球蛋白來檢測人的抗體形成細胞,此法稱SPA-SRBC溶血空斑試驗。在此檢測系統(tǒng)中加入抗人Ig,能與受檢細胞產(chǎn)生的Ig結(jié)合成復(fù)合物,并通過復(fù)合物中抗人IgFc段與致敏SRBC上的SPA結(jié)合,激活補體而使SRBC溶解??瞻咝纬杉毎臋z測,有助于免疫應(yīng)答動力學(xué)的研究和探討藥物對機體免疫狀態(tài)的影響。是目前研究B細胞抗體產(chǎn)生功能的重要手段。
2.定量溶血分光光度法(QHS)
該法又稱B細胞介導(dǎo)的紅細胞定量溶血分光光度法,是根據(jù)溶血空斑試驗的原理衍化而來,醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理可用以測定由B細胞產(chǎn)生和分泌的抗體裂解紅細胞所釋放的血紅蛋白(以吸光值表示),從而反映機體的體液免疫功能。試驗時,將免疫的脾細胞與SRBC及新鮮豚鼠血清等體積混合,于37℃水浴1小時,離心后測上清吸光值,其與產(chǎn)生抗體的量成正比。
3.ELISA-空斑試驗(ELISA-plaque assay)
又稱酶聯(lián)免疫斑點試驗(ELISPOT)。該法與ELISA不同之處是,加入的待檢標本是細胞,而非可溶性物質(zhì);所使用的底物可形成不溶性終產(chǎn)物。ELISPOT不僅可應(yīng)用于B細胞分泌抗體功能的測定,也能檢測分泌細胞因子的T細胞和巨噬細胞?,F(xiàn)已有應(yīng)用該技術(shù)于計數(shù)類風(fēng)濕因子分泌細胞的報道,但尚未在臨床推廣。
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