(一)抗ENA抗體譜概述
ENA(extractable nuclear antigens)是可提取性核抗原的總稱。ENA是細(xì)胞內(nèi)許多小分子的RNA和多肽組成的非組蛋白的酸性核蛋白顆粒。ENA主要包括Sm、RNP、SSA、SSB、Jo-1、Scb-70等抗原。不同的自身免疫病可以產(chǎn)生不同的抗ENA抗體。ENA抗體的檢測對自身免疫性疾病的診斷和鑒別診斷具有重要意義。
(二)檢測方法
檢測方法有多種,如免疫印跡法(immunoblotting,IBT)、ELISA、對流免疫電泳、雙擴散、金標(biāo)法等。這里主要介紹免疫印跡技術(shù)。
免疫印跡技術(shù)屬于膜載體酶免疫技術(shù),其固相載體為吸附有抗原的硝酸纖維膜。其基本原理為從小牛或兔胸腺提取ENA醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集|整理,經(jīng)過SDS-PAGE電泳分成區(qū)帶,然后轉(zhuǎn)印至硝酸纖維膜上,將待檢血清(含抗ENA抗體)加在硝酸纖維膜上,抗ENA抗體與ENA抗原結(jié)合,形成Ag-Ab復(fù)合物,加入酶標(biāo)抗人IgG,形成Ag-Ab-酶標(biāo)Ab復(fù)合物,然后加入底物顯色。與標(biāo)準(zhǔn)條帶對比判讀,可以確定不同的抗ENA抗體。
免疫印跡技術(shù)不需純化抗原,靈敏度高,特異性強,操作簡便,是廣泛采用的檢測抗ENA抗體的技術(shù)。
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