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弓形蟲病的輔助檢查項目

2013-09-01 11:19 醫(yī)學教育網(wǎng)
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病原檢查

1.直接鏡檢

取患者血液、骨髓或腦脊液、胸腹水、痰液、支氣管肺泡灌洗液、眼房水、羊水等作涂片,或淋巴結、肌肉、肝、胎盤等活組織切片,作瑞氏或姬氏染色鏡檢可找到滋養(yǎng)體或包囊,但陽性率不高。亦可作直接免疫熒光法檢查組織內(nèi)弓形蟲。

2.動物接種或組織培養(yǎng)

取待檢體液或組織懸液,接種小白鼠腹腔內(nèi),可產(chǎn)生感染并找到病原體,第一代接種陰性時,應盲目傳代3次。或作組織(猴腎或豬腎細胞)培養(yǎng)以分離、鑒定弓形蟲。

3.DNA雜交技術

 國內(nèi)學者首次應用32P標記含弓形蟲特異DNA序列的探針,與患者外周血內(nèi)細胞或組織DNA進行分子雜交,顯示特異性雜交條帶或斑點為陽性反應。特異性和敏感性均高。此外,國內(nèi)亦已建立多聚酶鏈反應診斷本病,并與探針雜交、動物接種和免疫學檢查方法相比較,顯示春具高度特異、敏感和快速等優(yōu)點。

免疫學檢查

1.檢測抗體

所用抗原主要有速殖子可溶性抗原(胞質抗原)和胞膜抗原。前者的抗體出現(xiàn)較早(用染色試驗、間接免疫熒光試驗檢測)、而后者的抗體出現(xiàn)較晚(用間接血凝試驗等檢測)。同時采用多種方法檢測可起互補作用而提高檢出率。由于弓形蟲在人體細胞內(nèi)可長期存在,故檢測抗體一般難以區(qū)別現(xiàn)癥感染或以往感染,可根據(jù)抗體滴度的高低以及其動力學變化加以判斷。常用的檢測方法有:

(1)染色試驗(Sabin-FeldmanDT):檢測IgG抗體。感染后1~2周出現(xiàn)陽性,3~5周抗體效價達高峰,以后逐漸下降,可維持多年??贵w效價1∶陽性提示為隱性感染;1∶256為活動性感染1∶1024為急性感染。其缺點為需要活蟲進行操作醫(yī)學|教育網(wǎng)搜集整理。

(2)間接熒光抗體試驗(IFAT):檢測IgM和IgG抗體。具靈敏、特異、快速、重復性好等優(yōu)點,與DT基本一致。但如有類風濕因子、抗核抗體陽性時,可引起假陽性反應。血清抗體效價1∶64為既往感染,余同DT.

(3)間接血凝試驗(IHA):試驗方法簡便。與DT結果符合率高。但一般在病后一個月左右出現(xiàn)陽性。結果判斷同IFAT.重復性差和致敏紅細胞不穩(wěn)定與其缺點。

(4)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA):可檢查IgM與IgG抗體。并有靈每度高、特異性強等優(yōu)點。也可用于抗原鑒定。近年來在ELISA的基礎上又創(chuàng)建、衍生了多種新新的測定方法,如金葡萄A蛋白(SPA)-ELISA;辣根過氧化物酶標記SPA取代酶標第二抗體進行ELISA檢測(PPA-ELISA);親和素-生物素(ABG)ELISA;凝膠擴散(DIG)-ELISA;斑點(DDT)-ELISA以及單克隆抗體(McAb)-ELISA等更靈敏、更特異的方法。

(5)放射免疫試驗(RIA):具有高度敏感性和特異性。

2.檢測抗原

系用免疫學方法檢測宿主細胞內(nèi)的病原(速殖子或包囊)、在血清及體液中的代謝或裂解產(chǎn)物(循環(huán)抗原)。是早期診斷和確診的可靠方法。國內(nèi)外學者建立了McAb-ELISA以及McAb與多抗的夾心型ELISA法檢測急性患者血清循環(huán)抗原,其敏感度為能檢出血清中0.4μg/ml的抗原。

皮內(nèi)試驗

以受染小白鼠腹腔液或雞胚液作抗原。常出現(xiàn)延遲性、結核菌素反應。可用作流行病學調查。目前應用不多。

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