CD4細胞及CD8細胞的分離:
(1)CD4細胞的分離:將一定量的T細胞懸液通過一根SephDdexC—10柱,然后用少量的RPMll640培養(yǎng)洗滌,收獲的細胞懸液約含85%的CD4細胞。醫(yī)學|教育|網(wǎng)搜集整理
(2)CD8細胞分離:用Tris緩沖液稀釋羊抗鼠IgG(濃度為10μg/m1)包被一平皿表面,然后放置4℃過夜,沒有包被上的抗體用PBS洗凈。然后將已標記有抗CD8單克隆抗體的T細胞(細胞濃度為1×l07/m1)3m1加入上述的平皿內(nèi),4℃放置2小時,用PBS輕輕洗凈末粘附的細胞,然后用毛細管加入10m1PBS吹打。收集的脫落細胞經(jīng)洗滌后懸浮在RPMIl640培基中備用。CD4細胞亦可用此法分離。