（一）細(xì)胞增殖法

1.淋巴細(xì)胞增殖法IL-1具有淋巴細(xì)胞活化因子的活性，可以協(xié)同促有絲分裂原刺激T細(xì)胞或胸腺細(xì)胞發(fā)生有絲分裂，同時(shí)IL-1可以刺激T細(xì)胞產(chǎn)生IL-2或其它T細(xì)胞生長(zhǎng)因子，并使之表達(dá)相應(yīng)的受體。因此用細(xì)胞增殖法檢測(cè)IL-1可有直接增殖法和間接增殖法兩種。

（1）直接增殖法：IL-1在促有絲分裂原存在的情況下，能夠促使胸腺淋巴細(xì)胞和某些體外建株的T細(xì)胞克隆生長(zhǎng)，因此測(cè)定這些細(xì)胞的增殖情況即可反映IL-1的活性。小鼠胸腺細(xì)胞測(cè)定法操作簡(jiǎn)單，比較常用，缺點(diǎn)是缺少特異性，因?yàn)镮L-2亦可協(xié)同促有絲分裂原刺激胸腺細(xì)胞增殖。D10G4.1（一種小鼠TH細(xì)胞克?。y(cè)定法較胸腺細(xì)胞測(cè)定法的敏感性高，且D10G4.1對(duì)IL-2不敏感，因此特異性增強(qiáng)，缺點(diǎn)是需要長(zhǎng)期飼養(yǎng)細(xì)胞株，該實(shí)驗(yàn)以3H-TdR摻入法或MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。通常IL-1濃度越高，細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力越強(qiáng)，IL-1濃度低于0.05ng/ml時(shí)，細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力接近促有絲分裂原單獨(dú)刺激的程度。

（2）間接增殖法：某些品系小鼠的T細(xì)胞系只有在IL-1存在的條件下才能產(chǎn)生IL-2，并且IL-2的產(chǎn)生量與IL-1的濃度成直線關(guān)系。因此可以利用IL-2依賴(lài)細(xì)胞株（如CTLL2）測(cè)定IL-2，藉以間接測(cè)定IL-1的含量。

2.成纖維細(xì)胞增殖法IL-1能刺激成纖維細(xì)胞的增殖，故可利用來(lái)源于新生兒包皮或傳代的人皮膚成纖維細(xì)胞（如CRL1445）測(cè)定IL-1.國(guó)內(nèi)常用小鼠成纖維細(xì)胞瘤L929細(xì)胞株。

檢測(cè)原則是將生長(zhǎng)成單層的L929細(xì)胞用胰酶消化后，配成適當(dāng)濃度的細(xì)胞懸液，繼將不同稀釋度的待測(cè)樣本與L929細(xì)胞懸液分加入96孔培養(yǎng)液中。一式三份，并設(shè)置陰性對(duì)照，放入37℃、5%CO2的溫箱中溫育72h，在第16h時(shí)加入適量3H-TdR，繼續(xù)溫育，結(jié)束后離心棄去培養(yǎng)上清，加入適量胰酶消化數(shù)分鐘后，收集細(xì)胞測(cè)定cpm值或吸光度值。

（二）其他方法

1.骨和較骨組織測(cè)定法利用IL-1可誘導(dǎo)膠原酶釋放，破壞軟骨組織的特性，用分光光度計(jì)測(cè)定軟骨硫酸鹽釋放量，即可間接椎知IL-1量。又如IL-1能影響骨質(zhì)吸收，應(yīng)用放射性45Ca通過(guò)小鼠頭頂骨系統(tǒng)吸收可測(cè)定IL-1活性，為骨質(zhì)吸收釋放法。

2.PGE2測(cè)定法IL-1作用于下丘腦，誘導(dǎo)腦細(xì)胞合成前列腺素E2（PGE2），發(fā)揮致熱原作用；還能誘導(dǎo)原代培養(yǎng)或建株傳代的成纖維細(xì)胞產(chǎn)生PGE2，故可用放免疫技術(shù)測(cè)定PGE2藉以間接測(cè)定IL-1。

3.放射免疫測(cè)定法本法利用受檢IL-1樣品與碘標(biāo)記IL-1競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合Sepharose4B中抗IL-1抗體結(jié)合位點(diǎn)的原理而設(shè)計(jì)。該法敏感性較高，且可排除樣品中其它干擾因素的影響，其特點(diǎn)是可以區(qū)分IL-1α和IL-1β。醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理

4.體內(nèi)測(cè)定法IL-1在體內(nèi)可誘導(dǎo)發(fā)熱、引起急性期蛋白合成及影響血中鐵和鋅水平。實(shí)驗(yàn)室多利用IL-1的致熱原作用加以檢測(cè)。在給動(dòng)物靜脈注射IL-1前后，以體溫的升高幅度表示IL-1的活性，或定期測(cè)定血清中某些急性期蛋白的含量，如血清淀粉樣蛋白A，血清淀粉樣蛋白P等。

總之，由于IL-1的生物學(xué)活性比較廣泛，其檢測(cè)方法亦多種多樣，但每種方法均有其缺點(diǎn)，往往需要結(jié)合使用。T細(xì)胞增殖法簡(jiǎn)便、易行且敏感，但樣品中若混有IL-2，則可協(xié)同促有絲分裂原刺激T細(xì)胞增殖，從而干擾IL-1的測(cè)定。血清中的TNF同樣可以刺激成纖維細(xì)胞的增殖，也可用成纖維細(xì)胞測(cè)定法，但特異性較差。放免法可排除其它因子的干擾，但此法僅測(cè)得IL-1的抗原性，不能完全代表其生物學(xué)活性。