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招生方案

IgG4酶聯(lián)免疫分析的建立及初步應(yīng)用

2009-03-13 16:32 來源:
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  摘 要:用兔抗人IgG4的多克隆抗體(IgG4Ab)包被成固相板,以識別結(jié)合待測標(biāo)本中的IgG4。用生物素標(biāo)記IgG4Ab得Bio-IgG4Ab;用親和素標(biāo)記辣根酶得HRP-A。在已包被IgG4Ab的固相板中加入IgG4標(biāo)準(zhǔn)品(或待測樣品),反應(yīng)、洗滌后,加入Bio-IgG4Ab,反應(yīng)、洗滌后,加入HRP-A,反應(yīng)、洗滌后,板上形成IgG4Ab-IgG4-Bio-IgG4Ab-HRP-A復(fù)合物,加酶底物顯色,用酶標(biāo)儀在490 nm波長測定OD值,作標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,查出標(biāo)本中IgG4含量。該法測定范圍:2.5~200ng/mL,最低檢出量2.1ng/mL,批內(nèi)和批間CV分別8.4%和11.2%。測得血清IgG4含量:青年人(30名)為37.7±2.3ng/mL;30名獻(xiàn)血員為42.7±9.9ng/mL,49例重癥監(jiān)護(hù)患者明顯升高為71.2±9.2ng/mL;49例肺部感染患者明顯降低為28.4±9.2 ng/mL。

  結(jié)果 表明該法穩(wěn)定,靈敏度適于檢出人血清IgG4水平。

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