摘 要：目的以噬菌體展示具有天然結(jié)構(gòu)的人CD28分子胞外區(qū)同二聚體，檢測(cè)其抗原性和生物活性，為CD28拮抗性類肽的篩選奠定基礎(chǔ)。

　　方法 RT-PCR從Jurkat細(xì)胞擴(kuò)增CD28胞外區(qū)，將其克隆入噬菌粒載體pComb3HSS，構(gòu)建的重組載體電轉(zhuǎn)入受體菌XL1-blue，并加輔助噬菌體VCSM13，使CD28胞外區(qū)展示在噬菌體表面。以ELISA、流式細(xì)胞儀檢測(cè)噬菌體展示CD28的抗原性和與B7-1的結(jié)合力。MTT法檢測(cè)噬菌體展示CD28的生物活性。

　　結(jié)果 成功構(gòu)建表達(dá)人CD28分子胞外區(qū)同二聚體的重組噬菌粒載體pComb3H-CD28，并以噬菌體展示系統(tǒng)展示CD28分子。ELISA和FCM結(jié)果顯示，噬菌體展示CD28可與抗CD28抗體特異性結(jié)合，也可與Jurkat細(xì)胞表面CD28競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗CD28抗體，具有CD28抗原性。噬菌體展示CD28可與B7-1特異性結(jié)合，也可與Raji細(xì)胞表面CD80結(jié)合，具有與配體結(jié)合能力。體外生物活性實(shí)驗(yàn)顯示，噬菌體展示CD28可抑制抗CD28抗體刺激的人外周血淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)。

　　結(jié)論 利用噬菌體展示系統(tǒng)成功展示CD28同源二聚體，噬菌體展示CD28具有抗原性及生物活性，為以CD28為靶點(diǎn)體外篩選CD28拮抗性類肽，從而防治移植排斥反應(yīng)和自身免疫病奠定了基礎(chǔ)。