熒光技術(shù)中有關(guān)的概念和參數(shù)常用的如下:
發(fā)射光譜:指固定激發(fā)波長,在不同波長下所記錄到的樣品發(fā)射熒光的相對強度。
激發(fā)光譜:指固定檢測發(fā)射波長,在不同波長的激發(fā)光激發(fā)樣品所記錄到的相應(yīng)的熒光發(fā)射強度。
熒光效率:熒光分子不會將全部吸收的光能都轉(zhuǎn)變成熒光,總或多或少地以其他形式釋放。熒光效率是指熒光分子將吸收的光能轉(zhuǎn)變成熒光的百分率,與發(fā)射熒光光量子的數(shù)值成正比。熒光效率=發(fā)射熒光的光量分子數(shù)(熒光強度)/吸收光的光量子數(shù)(激發(fā)光強度),發(fā)射熒光的光量子數(shù)亦即熒光強度,除受激發(fā)光強度影響外,也與激發(fā)光的波長有關(guān)。各個熒光分子有其特定的吸收光譜和發(fā)射光譜(熒光光譜),即在某一特定波長處有最大吸收峰和最大發(fā)醫(yī)學教育網(wǎng)整理射峰。選擇激發(fā)光波長最接近于熒光分子的最大吸收峰波長,且測定光波長在接近于最大發(fā)射光波峰時,得到的熒光強度也最大。
熒光壽命:指熒光物質(zhì)被一瞬時光脈沖激發(fā)后產(chǎn)生的熒光隨時間而衰減到一定程度時所用的時間。
熒光的猝滅:指熒光物質(zhì)的熒光輻射醫(yī)學教育網(wǎng)整理能力在受到激發(fā)光較長時間照射后會發(fā)生減弱的現(xiàn)象。這是由于激發(fā)態(tài)分子的電子不能回復(fù)到基態(tài),所吸收的能量無法以熒光的形式發(fā)射。一些化合物有天然的熒光猝滅作用而被用作猝滅劑,以消除不需用的熒光。因此熒光物質(zhì)的保存應(yīng)注意避免光(特別是紫外光)的直接照射和與其他化合物的接觸。