在80年代開(kāi)創(chuàng)了許多新的生物學(xué)技術(shù)用于免疫學(xué)研究,大大促進(jìn)了免疫學(xué)發(fā)展。
(1)細(xì)胞融合技術(shù):1975年Kohler和Milstein首先報(bào)道應(yīng)用小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)綿羊紅細(xì)胞致敏的小鼠脾細(xì)胞融合。結(jié)果發(fā)現(xiàn)一部分融合的雜交細(xì)胞既能繼續(xù)生長(zhǎng),又能分泌抗羊紅細(xì)胞抗體,將這種雜交細(xì)胞系統(tǒng)稱(chēng)為雜交瘤。這是一項(xiàng)突破性生物技術(shù),應(yīng)用這種方法可制備單一抗原決定簇的單克隆抗體,為生物科學(xué)和醫(yī)學(xué)的研究提供了廣闊的應(yīng)用前景。
(2)T細(xì)胞克隆技術(shù)的建立:Morgan等(1976)首先證明了T細(xì)胞生長(zhǎng)因子在體外培養(yǎng)條件下可刺激T細(xì)胞克隆長(zhǎng)期生長(zhǎng),在過(guò)去10年中應(yīng)用T細(xì)胞克隆技術(shù)已建立了一系列抗原特T細(xì)胞克隆用以研究T細(xì)胞受體、淋巴因子的分泌以及細(xì)胞間協(xié)同作用等方面的研究,為細(xì)胞免疫學(xué)的發(fā)展做出了巨大貢獻(xiàn)。
(3)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用:轉(zhuǎn)基因技術(shù)也是近年來(lái)生物技術(shù)中一項(xiàng)重大突破成就醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理。它的建立使動(dòng)物不必通過(guò)有性雜交即能獲得新的基因,開(kāi)創(chuàng)了一條新途徑。它的基本原因是將外源基因?qū)氩溉轭?lèi)動(dòng)物的受精卵或其早期胚胎,然后分析胚胎或其后代組織中的基因表達(dá)。目前主要以小鼠為模型構(gòu)建和培育不同性狀的轉(zhuǎn)基因鼠已在許多研究領(lǐng)域中得到應(yīng)用。
(4)分子雜交技術(shù)的應(yīng)用:分子雜交的原則是根據(jù)雙鏈核酸分子經(jīng)高溫解鏈,可分開(kāi)為二條互補(bǔ)的單鏈?;謴?fù)原溫度又可使原來(lái)的雙鏈結(jié)構(gòu)聚合。二條不同單鏈分子根據(jù)堿基配對(duì)的原則,只要它們的堿基序列同源,即堿基完全互補(bǔ)或部分互補(bǔ),就可發(fā)生全部或部分復(fù)性,此即核酸雜交。通常二種待雜交的分子之一是已知的,并可預(yù)先用放射性同位素或生物素進(jìn)行標(biāo)記,稱(chēng)為分子探針。以此探針識(shí)別或釣出另一種核酸分子中與其同源部分,即目的基因或靶基因。它有極高的特異性和敏感性,其實(shí)驗(yàn)方法可分為吸印雜交法(southernblot),斑點(diǎn)雜交法和原位雜交。這一方法已廣泛用于分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的研究。
分子遺傳學(xué)的理論和分子雜交技術(shù)也大大促進(jìn)了分子免疫學(xué)的發(fā)展。目前已開(kāi)展了對(duì)免疫球蛋白分子、T細(xì)胞受體分子、補(bǔ)體分子、細(xì)胞因子以及MHC分子等的基因結(jié)構(gòu)、功能及其表達(dá)機(jī)制的研究。對(duì)一些細(xì)胞因子通過(guò)基因工程已獲得了純化和有活性的重組分子,為進(jìn)一步研究免疫分子的結(jié)構(gòu)與功能以及臨床診斷和治療提供了理想的制劑。
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