堿性磷酸酶的概述是檢驗(yàn)技師考試的內(nèi)容,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理相關(guān)內(nèi)容供大家參考。
堿性磷酸酶(AP):是從牛腸粘膜或大腸桿菌中提取。從大腸桿菌提取的AP分子量為80kD,酶作用的最適pH為8.0;用小牛腸黏膜提取的AP分子量為l00kD,最適pH為9.6.一般采用對(duì)硝基苯磷酸酯(p-NPP)作為底物。它可制成片狀試劑,使用方便。產(chǎn)物為黃色的對(duì)硝基酚,在405nm有吸收峰。用NaOH終止酶反應(yīng)后,黃色可穩(wěn)定一段時(shí)間。
在ELISA中應(yīng)用AP系統(tǒng),其敏感性一般高于應(yīng)用HRP系統(tǒng),空白值也較低。但由于AP較難得到高純度制劑,穩(wěn)定性較HRP低,價(jià)格較HRP高,制備酶結(jié)合物時(shí)得率較HRP低等原因,國(guó)內(nèi)在ELISA中一般均采用HRP.
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