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B細(xì)胞表面標(biāo)志檢測(cè)

2011-07-27 17:31 來源:
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  B細(xì)胞表面標(biāo)志檢測(cè)是檢驗(yàn)主管技師考試要求掌握的內(nèi)容,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理相關(guān)內(nèi)容供大家參考。

  B細(xì)胞具有多種特異性抗原和受體,據(jù)此建立了相應(yīng)的檢測(cè)方法,一般用以研究B細(xì)胞各分化發(fā)育階段的特性,也可藉以鑒定和計(jì)數(shù)各階段B細(xì)胞在人外周血和淋巴樣組織的分布以及疾病時(shí)的變化動(dòng)態(tài),為臨床提供診治相關(guān)疾病的有用信息。

  1.B細(xì)胞表面抗原的檢測(cè):B細(xì)胞表面有CD19、CD20、CD21、CD22和CD29等分化抗原,其中有些系全部B細(xì)胞所共有,而有些僅活化B細(xì)胞所特有,據(jù)此可用相應(yīng)的CD系列單克隆抗體,通過間接熒光免疫法、酶免疫組化或ABC法加以檢測(cè)。

  2.SmIg的檢測(cè):大多采用間接熒光免疫法或包括ABC法在內(nèi)的酶免疫組化法,關(guān)鍵是選用高效價(jià)、高特異性和高親和力的熒光或酶標(biāo)記的多價(jià)抗人Ig抗體,也可分別用各種類型的Ig,即IgM、IgG、IgA、IgE等抗血清,檢測(cè)帶有各種類型Ig的B細(xì)胞,在人外周血中以帶有SmIgM的細(xì)胞數(shù)為最多。B細(xì)胞經(jīng)熒光標(biāo)記的抗Ig抗體染色,細(xì)胞膜表面呈現(xiàn)的熒光著色可有不同的形式,開始均勻分布呈環(huán)狀,其后集中在某些部位呈斑點(diǎn)狀,然后又可集在一個(gè)部位呈帽狀,最后可被吞飲入胞漿直至熒光消失。這一現(xiàn)象是由于淋巴細(xì)胞膜由雙層類脂組成,上嵌有蛋白分子,在體溫條件下,膜呈半液體狀,而鑲嵌物能在其中移動(dòng)。當(dāng)SmIg抗體發(fā)生結(jié)合時(shí),由于抗血清為雙價(jià),使SmIg出現(xiàn)交聯(lián)現(xiàn)象,這種抗原與抗體結(jié)合物可連成斑點(diǎn)和帽狀,時(shí)間過長(zhǎng),帽狀結(jié)合物可脫落或被吞飲而消失,因此染色后,觀察時(shí)間不能超過30min,或在染色時(shí)加疊氮鈉防止帽狀物形成或被吞飲。

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