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自然殺傷細胞及功能的檢測

2011-07-27 17:32 來源:
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  自然殺傷細胞(NK)及功能的檢測是檢驗主管技師考試要求掌握的內(nèi)容,醫(yī)學教育網(wǎng)搜集整理相關(guān)內(nèi)容供大家參考。

  NK細胞表面至少存在CD2、CD11b、CDllc、CDl6、CD56和CD69等多種抗原,但均非NK細胞所特有,因此極少以CD系列抗原為指標鑒定和計數(shù)NK細胞,現(xiàn)多檢測NK細胞活性,因NK細胞具有細胞介導(dǎo)的細胞毒作用,它能直接殺傷靶細胞。測定人NK細胞活性多以K562細胞株作為靶細胞,而測小鼠NK細胞活性則用YAC細胞株,檢測方法多種多樣。

  1.形態(tài)法:將效應(yīng)細胞與靶細胞按一定比例混合溫育,繼用臺盼藍或伊紅Y等活細胞拒染的染料處理,然后分別計數(shù)著染的死細胞和不著染的活細胞,推算NK細胞活性。

  2.酶釋放法:將效應(yīng)細胞與靶細胞按一定比例混合溫育,離心沉淀,取上清液檢測靶細胞遭破壞后釋放出的酶含量。

  3.熒光法:用熒光素標記靶細胞,經(jīng)與效應(yīng)細胞共溫后,離心去上清,用熒光計檢測剩余的活靶細胞的熒光。

  4.核素法:將效應(yīng)細胞與靶細胞按一定比例混合共溫后,離心檢測上清液或剩余靶細胞放射性的量,間接反映其活性。方法有靶細胞胞漿釋放法和胞核釋放法兩種。

  5.化學發(fā)光法:當效應(yīng)細胞與靶細胞接觸時,效應(yīng)細胞呼吸暴發(fā),生成極不穩(wěn)定的O2-及OH-,放出光子,在發(fā)光劑存在條件下,可被光電倍增管接受和計數(shù),發(fā)光量與NK細胞殺傷能力相關(guān)。

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