酸性磷酸酶測定:硝酸鉛法是檢驗主管技師考試要求掌握的內(nèi)容,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理相關(guān)內(nèi)容供大家參考。
硝酸鉛法:本法優(yōu)點是用普通試劑,價格便宜,一般實驗室均有條件做,封片后可較長時間保存,并可用電子顯微鏡研究觀察細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。缺點是細(xì)胞必需固定,而且固定條件要求嚴(yán)格,如處理不當(dāng)酶活性易消失,反應(yīng)步驟也較多。
該法基本原理是在適當(dāng)?shù)拿感詶l件下,巨噬細(xì)胞內(nèi)的酸性磷酸酶能使β甘油磷酸鈉水解成磷酸鹽后,后者與硝酸鉛反應(yīng)產(chǎn)生磷酸鉛,而磷酸鉛再與硫酸銨反應(yīng)則形成黑色硫化鉛,沉積在胞漿內(nèi)酸所在處,顯示棕黑色顆粒。酶活性強(qiáng)弱可根據(jù)顆粒的數(shù)量和粗細(xì)不同而分級判斷,顆粒數(shù)量少則細(xì)的為+,顆粒多而粗的為++,顆粒很多且很粗的為+++。