(一)電解質(zhì)
抗原與抗體發(fā)生結(jié)合后,由親水膠體變?yōu)槭杷z體的過程中,須有電解質(zhì)參與才能進一步使抗原抗體復(fù)合物表面失去電荷,水化層破壞,復(fù)合物相互靠攏聚集形成大塊的凝集或沉淀。醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理若無電解質(zhì)參加,則不出現(xiàn)可見反應(yīng)。為了促使沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%~0.9%(人、畜)或8%~10%(禽)的氯化鈉或各種緩沖液(免疫標(biāo)記技術(shù))作為抗原和抗體的稀釋液或反應(yīng)液。但電解質(zhì)的濃度不宜過高,否則會出現(xiàn)鹽析現(xiàn)象。
(二)溫度
在一定溫度范圍內(nèi),溫度越高,抗原、抗體分子運動速度越快,這可以增加其碰撞的機會,加速抗原抗體結(jié)合和反應(yīng)現(xiàn)象的出現(xiàn),如凝集和沉淀反應(yīng)通常在37℃水浴感作(即將試驗材料加蓋保濕恒溫作用)一定時間醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理,以促進反應(yīng)現(xiàn)象的出現(xiàn),若用56℃水浴則反應(yīng)更快。但有的抗原抗體結(jié)合則需長時間在低溫下,才能使反應(yīng)完成的比較充分、徹底,如有的補體結(jié)合試驗在0℃~4℃冰箱結(jié)合效果更好。
(三)酸堿度
血清學(xué)試驗要求在一定的pH下進行,常用的pH值為6~8,過高或過低,均可使已結(jié)合的抗原抗體復(fù)合物重新解離。若pH降至抗原或抗體的等電點時,會發(fā)生非特異性的酸凝集,造成假象。
(四)振蕩
適當(dāng)?shù)臋C械振蕩能增加分子或顆粒間的相互碰撞,加速抗原抗體的結(jié)合反應(yīng),但強烈的振蕩可使抗原抗體復(fù)合物解離。
(五)雜質(zhì)和異物
試驗介質(zhì)中如有與反應(yīng)無關(guān)的雜質(zhì)、異物(如蛋白質(zhì)、類脂質(zhì)、多糖等物質(zhì))存在時,醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理會抑制反應(yīng)的進行或引起非特異性反應(yīng),故每批血清學(xué)試驗都應(yīng)設(shè)陽性對照和陰性對照試驗。
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