臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室接到標(biāo)本后應(yīng)立即進(jìn)行微生物學(xué)檢驗(yàn)。主要包括直接鏡檢、檢測特異性抗原或病原體成分、進(jìn)行分離培養(yǎng)和鑒定、體外藥敏試驗(yàn)等。

　　（一）直接鏡檢

　　標(biāo)本經(jīng)涂片染色或制備濕片鏡檢，有些標(biāo)本如尿液、腦脊液等經(jīng)過離心濃縮后鏡檢出其初步結(jié)果對有些病人標(biāo)本有診斷參考價(jià)值。直接鏡檢對于確定進(jìn)一步檢出步驟及鑒定方法也很有幫助。另外，直接鏡檢還可評價(jià)標(biāo)本是否符合檢驗(yàn)要求醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理。

　　（二）快速診斷

　　快速檢測病原體成分主要是指特異性抗原和核酸檢測。特異性抗原檢測包括免疫熒光技術(shù)、膠乳凝集試驗(yàn)、酶免疫技術(shù)、對流免疫電泳、化學(xué)發(fā)光免疫測定等。核酸檢測包括核酸探針雜交、PCR技術(shù)。其他快速檢測法還有氣-液相色譜法、化學(xué)發(fā)光、生物發(fā)光測定法和基因或蛋白微型陣列芯片技術(shù)等醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理。

　　（三）直接藥敏試驗(yàn)

　　直接藥敏試驗(yàn)即在分離培養(yǎng)病原體的同時(shí)，直接將臨床標(biāo)本接種于平板，用抗生素紙片作藥物敏感性試驗(yàn)，在18～24h內(nèi)可獲得結(jié)果。但因其在試驗(yàn)時(shí)接種量難以標(biāo)準(zhǔn)化，且對混有雜菌和混合感染的標(biāo)本不易明確其結(jié)果，故分離出純培養(yǎng)物后應(yīng)再作體外藥物敏感試驗(yàn)。

　　（四）常規(guī)檢驗(yàn)

　　1.分離培養(yǎng)：通常由正常無菌部位采取的標(biāo)本接種血平板，置于空氣或含5%～10%CO₂的氣缸中培養(yǎng)，大部分細(xì)菌可于24～48h生長良好。若原始培養(yǎng)為陰性，但據(jù)鏡檢結(jié)果和臨床信息提示可能有病原菌存在，則應(yīng)再采集大量標(biāo)本，離心濃縮或溶解離心法處理，取沉淀接種營養(yǎng)豐富的需氧或厭氧培養(yǎng)基來培養(yǎng)。

　　對于存在正常菌群部位采集的標(biāo)本，分離時(shí)應(yīng)采用選擇培養(yǎng)基以利于病原菌生長，也可加某些抗生素抑制污染菌的生長。對于某些感染標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌，如尿路感染的尿液中檢出大腸埃希菌，可能是病原菌，也可能是污染菌或正常菌群，其臨床意義的確定有賴于定量培養(yǎng)法。即取一定量的標(biāo)本如液體標(biāo)本用液體培養(yǎng)基作一系列稀釋；組織標(biāo)本稱量后制成懸液，并稀釋成10^-1，10^-2，10^-3等，分別取0.1ml涂布于血瓊脂平板或傾注培養(yǎng)，35℃24h后計(jì)算每克標(biāo)本所含細(xì)菌數(shù)。

　　2.鑒定：分離出的細(xì)菌一般應(yīng)經(jīng)過細(xì)菌形態(tài)、菌落特點(diǎn)、生化反應(yīng)、血清學(xué)試驗(yàn)、動物接種等鑒定。目前尚有某些微量鑒定系統(tǒng)，其鑒定快速、簡便，值得推廣。如用于鑒定腸桿菌科的20E，鑒定非發(fā)酵菌的20NE及鑒定厭氧菌的20A等。

　　3.體外純菌藥物敏感性試驗(yàn)：常用方法包括抑菌試驗(yàn)、殺菌試驗(yàn)、聯(lián)合藥敏試驗(yàn)和檢測細(xì)菌產(chǎn)生的抗生素滅活酶等醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理。

　　（五）報(bào)告

　　直接鏡檢要求2h報(bào)告，說明標(biāo)本是否合格，發(fā)現(xiàn)微生物情況和特點(diǎn)；初步鑒定和直接藥敏結(jié)果于24h或次晨報(bào)告，報(bào)告可能的病原菌和直接藥敏結(jié)果；最后鑒定和細(xì)菌藥敏結(jié)果一般不超過3天，還規(guī)定除血培養(yǎng)外，所有送檢標(biāo)本必須在24h內(nèi)預(yù)報(bào)。