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醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)臨床助理醫(yī)師:《答疑周刊》2008年第12期

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    【生物化學(xué)】哪列哪項(xiàng)為DNA聚合酶的特點(diǎn)
  A.需模板DNA
  B.需引物RNA
  C.延伸方向?yàn)?→3
  D.以NTP為原料
  E.具有3→5外切酶活性
  答案及解析:本題選D。
  DNA聚合酶以四種三磷酸脫氧核苷為原料,這種酶的共同性質(zhì)是:
 ?、傩枰狣NA模板,因此這類酶又稱為依賴DNA的DNA聚合酶(DNa dependent DNA polymerase, DDDP)。
 ?、谛枰猂NA或DNA做為引物(primer),即DNA聚合酶不能從頭催化DNA的起始。
 ?、鄞呋痙NTP加到引物的3′末端,因而DNA合成的方向是5′→3′。
三種DNA聚合酶都屬于多功能酶,它們?cè)贒NA復(fù)制和修復(fù)過程的不同階段發(fā)揮作用。

  【生物化學(xué)】有關(guān)變構(gòu)調(diào)節(jié)(或變構(gòu)酶)的敘述哪一項(xiàng)是不正確的:
  A.催化部位與別構(gòu)部位位于同一亞基
  B.都含有一個(gè)以上的亞基
  C.動(dòng)力學(xué)曲線呈S型曲線
  D.變構(gòu)調(diào)節(jié)可有效地和及時(shí)地適應(yīng)環(huán)境的變化
  E.該調(diào)節(jié)可調(diào)節(jié)整個(gè)代謝通路
  答案及解析:本題選A。
  變構(gòu)調(diào)節(jié)是指某些調(diào)節(jié)物能與酶的調(diào)節(jié)部位結(jié)合使酶分子的構(gòu)象發(fā)生改變,從而改變酶的活性,稱酶的變構(gòu)調(diào)節(jié)
  變構(gòu)酶allosteric enzymes
  1.概念
  有些酶除了活性中心外,還有一個(gè)或幾個(gè)部位,當(dāng)特異性分子非共價(jià)地結(jié)合到這些部位時(shí),可改變酶的構(gòu)象,進(jìn)而改變酶的活性,酶的這種調(diào)節(jié)作用稱為變構(gòu)調(diào)節(jié)(allosteric regulation),受變構(gòu)調(diào)節(jié)的酶稱變構(gòu)酶(allosteric enzyme),這些特異性分子稱為效應(yīng)劑(effector)。變構(gòu)酶分子組成,一般是多亞基的,分子中凡與底物分子相結(jié)合的部位稱為催化部位(catalytic site),凡與效應(yīng)劑相結(jié)合的部位稱為調(diào)節(jié)部位(regulatory site),這二部位可以在不同的亞基上,或者位于同一亞基。
  2.機(jī)理
 ?。?)一般變構(gòu)酶分子上有二個(gè)以上的底物結(jié)合位點(diǎn)。當(dāng)?shù)孜锱c一個(gè)亞基上的活性中心結(jié)合后,通過構(gòu)象的改變,可增強(qiáng)其他亞基的活性中心與底物的結(jié)合,出現(xiàn)正協(xié)同效應(yīng)(positivecooperative effect)。使其底物濃度曲線呈S形。即底物濃度低時(shí),酶活性的增加較慢,底物濃度高到一定程度后,酶活性顯著加強(qiáng),最終達(dá)到最大值Vmax.多數(shù)情況下,底物對(duì)其變構(gòu)酶的作用都表現(xiàn)正協(xié)同效應(yīng),但有時(shí),一個(gè)底物與一個(gè)亞基的活性中心結(jié)合后,可降低其他亞基的活性中心與底物的結(jié)合,表現(xiàn)負(fù)協(xié)同效應(yīng)(negative cooperative effect)。如3-磷酸甘油醛脫氫酶對(duì)NAD+的結(jié)合為負(fù)協(xié)同效應(yīng)。
 ?。?)變構(gòu)酶除活性中心外,存在著能與效應(yīng)劑作用的亞基或部位,稱調(diào)節(jié)亞基(或部位),效應(yīng)劑與調(diào)節(jié)亞基以非共價(jià)鍵特異結(jié)合,可以改變調(diào)節(jié)亞基的構(gòu)象,進(jìn)而改變催化亞基的構(gòu)象,從而改變酶活性。凡使酶醫(yī)學(xué)教育 網(wǎng)原創(chuàng)活性增強(qiáng)的效應(yīng)劑稱變構(gòu)激活劑(allosteric activitor),它能使上述S型曲線左移,飽和量的變構(gòu)激活劑可將S形曲線轉(zhuǎn)變?yōu)榫匦坞p曲線。凡使酶活性減弱的效應(yīng)劑稱變構(gòu)抑制劑(allosteric inhibitor),能使S形曲線右移。例如,ATP是磷酸果糖激酶的變構(gòu)抑制劑,而ADP、AMP為其變構(gòu)激活劑。
 ?。?)由于變構(gòu)酶動(dòng)力學(xué)不符合米-曼氏酶的動(dòng)力學(xué),所以當(dāng)反應(yīng)速度達(dá)到最大速度一半時(shí)的底物的濃度,不能用Km表示,而代之以K0.55表示。
  3.生理意義
 ?。?)在變構(gòu)酶的S形曲線中段,底物濃度稍有降低,酶的活性明顯下降,多酶體系催化的代謝通路可因此而被關(guān)閉;反之,底物濃度稍有升高,則酶活性迅速上升,代謝通路又被打開,因此可以快速調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)底物濃度和代謝速度。
 ?。?)變構(gòu)抑制劑常是代謝通路的終產(chǎn)物,變構(gòu)酶常處于代謝通路的開端,通過反饋抑制,可以及早地調(diào)節(jié)整個(gè)代謝通路,減少不必要的底物消耗。例如葡萄糖的氧化分解可提供能量使AMP、ADP轉(zhuǎn)變成ATP,當(dāng)ATP過多時(shí),通過變構(gòu)調(diào)節(jié)酶的活性,可限制葡萄糖的分解,而ADP、AMP增多時(shí),則可促進(jìn)糖的分解。隨時(shí)調(diào)節(jié)ATP/ADP的水平,可以維持細(xì)胞內(nèi)能量的正常供應(yīng)。

  【生物化學(xué)】在亮氨酸拉鏈中,每隔多少個(gè)氨基酸出現(xiàn)一個(gè)亮氨酸:
  A.7個(gè)
  B.3.6個(gè)
  C.9個(gè)
  D.12個(gè)
  E.7.2個(gè)
  答案及解析:本題選A。
  亮氨酸拉鏈(leucine zipper)是由伸展的氨基酸組成,每7個(gè)氨基酸中的第7個(gè)氨基酸是亮氨酸,亮氨酸是疏水性氨基酸,排列在。螺旋的一側(cè),所有帶電荷的氨基酸殘基排在另一側(cè)。當(dāng)2個(gè)蛋白質(zhì)分子平行排列時(shí),亮氨酸之間相互作用形成二聚體,形成“拉鏈”。在“拉鏈”式的蛋白質(zhì)分子中,亮氨酸以外帶電荷的氨基酸形式同DNA結(jié)合。
  亮氨酸拉鏈(leucine zipper):出現(xiàn)地DNA結(jié)合蛋白質(zhì)和其它蛋白質(zhì)中的一種結(jié)構(gòu)基元(motif)。當(dāng)來自同一個(gè)或不同多肽鏈的兩個(gè)兩用性的α-螺旋的疏水面(常常含有亮氨酸殘基)相互作用形成一個(gè)圈對(duì)圈的二聚體結(jié)構(gòu)時(shí)就形成了亮氨酸拉鏈。

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