感受態(tài)是指細菌處于容易吸收外源DNA的狀態(tài)。轉化是指質粒DNA或以它為載體構建的重組子導人細菌的過程。其原理是細菌處于0℃，CaCl2低滲溶液中，菌細胞膨脹成球形。轉化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羥基—鈣磷酸復合物粘附于細胞表面，經(jīng)42℃短時間熱擊處理，促進細胞吸收DNA復合物。將細菌放置在非選擇性培養(yǎng)基中保溫一段時間，促使在轉化過程中獲得的新的表型（如Ampr等）得到表達，然后將此細菌培養(yǎng)物涂在含有氨芐青霉素的選擇性培養(yǎng)基上。

　　重組質粒轉化宿主細胞后，還需對轉化菌落進行篩選鑒定。利用α互補現(xiàn)象進行篩選是最常用的一種鑒定方法?，F(xiàn)在使用的許多載體都具有一段大腸桿菌β半乳糖苷酶的啟動子及其編碼α肽鏈的DNA序列，此結構稱為lacZ'基因。lacZ'基因編碼的α肽鏈是β半乳糖苷酶的氨基端的短片段（146個氨基酸）。任何攜帶著lacZ'基因的質粒載體轉化了染色體基因組存在著此種β半乳糖苷酶突變的大腸桿菌細胞后，便會產生出有功能活性的半乳糖苷酶，在IPTG（異丙基β—D—硫代半乳糖苷）誘導后，在含有Xgal（5-溴-4-氯-3-吲哚-6-D-半乳糖苷）的培養(yǎng)基平板上形成藍色菌落（半乳糖苷酶能將無色的化合物Xgal切割成半乳糖和深藍色的底物5-溴-4-靛藍）。而當有外源DNA片段插入到位于lacZ'中的多克隆位點后，就會破壞α肽鏈的閱讀框，從而不能合成與受體菌內突變的β半乳糖苷酶相互補的活性α肽，而導致不能形成有功能活性的β半乳糖苷酶，也就不能分解Xgal而顯藍色，因此含有重組質粒載體的克隆往往是白色菌落醫(yī)學`教育網(wǎng)搜集整理。