1、總硒樣品預處理：

準確稱取混勻試樣約 1.00g～2.00g 置于消化管中，同時做試劑空白。樣品如含有乙醇等有機溶劑，先在水浴或電熱板上低溫揮發(fā)。若為膏霜型樣品，可預先在水浴中加熱使瓶壁上樣品融化流入瓶的底部。加入數(shù)粒玻璃珠，然后加入硝酸（3.1）10mL，由低溫至高溫加熱消解，當消解液體積減少到 2mL～3mL，移去熱源，冷卻。加入高氯酸（3.2）2mL～5mL，繼續(xù)加熱消解，不時緩緩搖動使均勻，消解至冒白煙，取下。稍冷后加入鹽酸（3.4）4mL繼續(xù)加熱至產(chǎn)生白煙，立即取下。

2、標準工作溶液的制備

取硒標準使用溶液（3.17）0、0.10、0.25、0.50、0.75、1.00、2.00mL 分別置于 100mL錐形瓶中，與樣品同時消解。

3、測定

將消解的樣品溶液及標準工作溶液分別轉(zhuǎn)移到 50mL 比色管中。分別向各管加入混合試劑（3.11）10mL，搖勻，溶液應呈桃紅色。用氨水（3.12）調(diào)至淺橙色，必要時可加入少量鹽酸（3.4），此時溶液 pH 值應為 1.5～2.0[也可用 pH0.5～5.0 精密試紙（3.9）檢驗].（以下步驟需在暗室內(nèi)進行）向上述各管內(nèi)加入 2，3-二氨基萘溶液（3.14）1mL，搖勻，置沸水浴中加熱 5min（自放入沸水浴中算起），取出，冷卻。向各管中加入環(huán)己烷（3.13）

4.0mL，加塞蓋嚴，振搖 2min.靜置分層待測。用滴管分別吸取各管中的環(huán)己烷相，用熒光分光光度計在激發(fā)光波長 379nm，發(fā)射光波長 519nm 測定其熒光強度。

繪制工作曲線，從曲線上查出樣品中硒含量。