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高效液相色譜法的基本原理:
影響柱效的主要因素是渦流擴(kuò)散和傳質(zhì)阻抗。
分類:
一、液固吸附色譜法:流動(dòng)相為液體,固定相是固體吸附劑。
二、液——液分配色譜法:固定相幾乎全是化學(xué)鍵合硅膠,又稱化學(xué)鍵合相色譜法。
按固定相和流動(dòng)相的極性又分:正相色譜法和反相色譜法。
1、正相色譜法:流動(dòng)相極性小于固定相極性的色譜法。用于分離溶于有機(jī)溶劑的極性及中等極性的分子型物質(zhì),用于含有不同官能團(tuán)物質(zhì)的分離。極性弱組分先流出。
2、反相色譜法:大于用于分離非極性至中等極性的分子型化合物。
三、高效液相色譜儀:
1、高壓輸液泵;
2、色譜柱;
3、進(jìn)樣閥;
4、檢測(cè)器:紫外吸收檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、差示折光檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)。
中國(guó)藥典2000對(duì)高效液相色譜法規(guī)定:除固定相種類、流動(dòng)相組分、檢測(cè)器類型不得任意更改外,其余均可適當(dāng)改變,色譜圖于20min內(nèi)記錄完畢。
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