風(fēng)濕病的臨床實(shí)踐和實(shí)驗(yàn)室檢查是臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技士考試需要了解的知識(shí)點(diǎn)，醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理了相關(guān)內(nèi)容，希望對(duì)廣大復(fù)習(xí)備考的考生有所幫助。

風(fēng)濕病的臨床實(shí)踐和實(shí)驗(yàn)室檢查：

一、定義

傳統(tǒng)認(rèn)為抗細(xì)胞核內(nèi)成分的抗體稱為抗核抗體（AutoantibodytoNuclearAntigen，ANA），這一概念強(qiáng)調(diào)了細(xì)胞核的重要性，因?yàn)榧?xì)胞核內(nèi)有DNA．RNA．堿性組蛋白、非組蛋白、磷脂及各種蛋白酶等復(fù)雜的化學(xué)組成，決定了ANA存在不同的成分，因此，構(gòu)成了抗核抗體譜（ANAs）。隨著免疫熒光技術(shù)的改進(jìn)，先進(jìn)的免疫學(xué)技術(shù)的應(yīng)用和分子生物學(xué)的發(fā)展，目前對(duì)ANA的理解已不再局限于核成分，而是指抗核酸（nucleicacid）和核蛋白（nucleoprotein）抗體的總稱。故現(xiàn)在對(duì)ANA靶抗原的理解已從傳統(tǒng)的細(xì)胞核擴(kuò)大到整個(gè)細(xì)胞。ANA在許多風(fēng)濕性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病、干燥綜合征、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等均可陽(yáng)性，因此是診斷彌漫性結(jié)締組織病的篩選抗體。健康老年人、感染性疾病和服用某些藥物（普魯卡因酰胺、肼苯噠嗪、苯妥英鈉、異煙肼等）的患者均可有ANA陽(yáng)性。

1954年Hargrave發(fā)現(xiàn)LE細(xì)胞奠定了當(dāng)今ANAs的基礎(chǔ)。已知LE因子即是ANA，它是一種抗DNA-組蛋白（DNP）復(fù)合物的抗體，目前已采用簡(jiǎn)易和迅速的抗DNP抗體測(cè)定取代LE細(xì)胞的檢查醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

二、測(cè)定原理和方法

常規(guī)檢測(cè)ANA的方法是以鼠肝和鼠腎為底物的間接免疫熒光法。由于某些抗原如SSA/RO、Jo-1、rRNP等在細(xì)胞漿內(nèi)比核內(nèi)含量多，因此，鼠肝或鼠腎作底物檢測(cè)常呈陰性反應(yīng)，為彌補(bǔ)這一不足，以核質(zhì)豐富的Hep-2細(xì)胞（人喉癌上皮細(xì)胞）為底物提高了ANA檢測(cè)的陽(yáng)性率（≥1：40為陽(yáng)性）。對(duì)于ANA陽(yáng)性的標(biāo)本，應(yīng)排除實(shí)驗(yàn)過(guò)程中血清洗脫不盡或標(biāo)有熒光素的抗人免疫球蛋白濃度過(guò)高而造成的假陽(yáng)性。必須強(qiáng)調(diào)指出，待測(cè)血清標(biāo)本一定要稀釋，因?yàn)榈偷味鹊腁NA可在感染性疾病、腫瘤及正常人中出現(xiàn)。未加稀釋的正常人血清可有1/3的呈陽(yáng)性ANA反應(yīng)，但其滴度較低。ANA作為自身免疫性結(jié)締組織病的篩選試驗(yàn)必須強(qiáng)調(diào)高滴度。對(duì)于ANA陰性的標(biāo)本，要考慮是否有底物保存不當(dāng)或操作過(guò)程中造成的誤差，抑或藥物治療后病情緩解所致。

ANAS的熒光染色型別有五種。

（1）均質(zhì)型：核質(zhì)染色均勻一致，此型與抗組蛋白抗體和抗DNA抗體有關(guān)；

（2）斑點(diǎn)型：核質(zhì)染色呈斑點(diǎn)狀，核膜存在，此型多與可溶性核抗原（ENA）抗體有關(guān)；

（3）核仁型：僅核仁著染熒光，與4—6SRNA抗體相關(guān)，在硬皮病中較多見(jiàn)；

（4）核周（核膜）型：熒光包繞在核膜周圍，多與抗雙鏈DNA抗體有關(guān)；

（5）著絲點(diǎn)型：處于分裂時(shí)相的Hep-2細(xì)胞為底物可出現(xiàn)依著絲點(diǎn)散在排列的特殊點(diǎn)狀圓形，與斑點(diǎn)型區(qū)別的重要之處在于前者核膜已消失，主要與雷諾現(xiàn)象有相關(guān)性。熒光染色核型可隨血清稀釋的改變而發(fā)生改變，如均質(zhì)型的ANA在血清稀釋后可出現(xiàn)斑點(diǎn)型和核周型。對(duì)于ANA陽(yáng)性的標(biāo)本，應(yīng)采用對(duì)流電泳法、免疫雙擴(kuò)散法、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）或放射免疫法、免疫印跡法等識(shí)別出確切類型，因不同類型的ANA有其不同的臨床意義。