噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)知識(shí)點(diǎn)
人類因有夢(mèng)想而偉大,行動(dòng)是夢(mèng)想的開端,努力吧!關(guān)于檢驗(yàn)職稱的考試,“噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)”是什么呢?相信很多朋友都想知道吧,為此醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為大家編輯整理了“噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)”相關(guān)知識(shí),希望有助于大家備考!祝大家考試順利,取得好成績(jī)!
將體外克隆的抗體基因片段插入噬菌體載體,轉(zhuǎn)染工程細(xì)菌進(jìn)行表達(dá),然后用抗原篩選即可獲得特異的單克隆噬菌體抗體。利用這一技術(shù)可以得到完全人源性的抗體,在HIV等病毒感染和腫瘤的診斷與治療方面有其獨(dú)特的優(yōu)越性。
(一)基本原理和程序
構(gòu)建噬菌體抗體庫(kù)通常包括以下幾個(gè)過程:
1.構(gòu)建噬菌體載體;
2.表達(dá)載體轉(zhuǎn)化細(xì)菌,構(gòu)建全套抗體庫(kù);
3.從外周血或脾、淋巴結(jié)等組織中分離B淋巴細(xì)胞,提取mRNA并反轉(zhuǎn)錄為cDNA;
4.應(yīng)用抗體輕鏈和重鏈引物,根據(jù)建庫(kù)的需要通過PCR技術(shù)擴(kuò)增不同的Ig基因片段。
(二)噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)的特點(diǎn)
1.模擬天然全套抗體庫(kù);
2.可獲得高親合力的人源化抗體;
3.避免使用人工免疫和雜交瘤技術(shù)。
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