抗原抗體反應是檢驗技士考試科目中臨床免疫學和免疫檢驗中的重點內(nèi)容,醫(yī)學教育網(wǎng)小編今天領(lǐng)大家一起來看看網(wǎng)校老師是如何講解這章節(jié)的重點知識點的。
「抗原抗體反應」
第一節(jié) 抗原抗體反應的原理
抗原與抗體能夠特異性結(jié)合是基于抗原決定簇(表位)和抗體超變區(qū)分子間的結(jié)構(gòu)互補性與親和性,這種特性是由抗原、抗體分子空間構(gòu)型所決定的。
除兩者分子構(gòu)型高度互補外,抗原表位和抗體超變區(qū)必須密切接觸,才有足夠的結(jié)合力。
一、抗原抗體結(jié)合力抗原抗體是一種非共價結(jié)合,不形成共價鍵。
1.靜電引力(庫倫引力):是因抗原、抗體帶有相反電荷的氨基與羧基基團間相互吸引的能力,這種吸引力的大小和兩個電荷間的距離平方成反比。兩個電荷距離越近,靜電引力越大。
2.范德華力:這是原子與原子、分子與分子相互接近時分子極化作用發(fā)生的一種吸引力,是抗原、抗體兩個大分子外層軌道上電子相互作用時,兩者電子云中的偶極擺動而產(chǎn)生的引力。這種引力的能量小于靜電引力。
3.氫鍵結(jié)合力:是供氫體上的氫原子與受氫體上氫原子間的引力。其結(jié)合力較強于范德華引力。
4.疏水作用:最強。水溶液中兩個疏水基團相互接觸,由于對水分子的排斥而趨向聚集的力。
二、抗原抗體的親和性和親合力親和性指抗體分子上一個抗原結(jié)合點與對應的抗原表位之間相適應而存在的引力,它是抗原抗體間固有的結(jié)合力。親和性用平衡常數(shù)K來表示,K值越大,親和性越強,與抗原結(jié)合也越牢固。
抗體的親合力指抗體結(jié)合部位與抗原表位間結(jié)合的強度,與抗體結(jié)合價、抗體的親和性、抗原有效表位數(shù)目等相關(guān)。
三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體抗體和大多數(shù)的抗原同屬蛋白質(zhì),在通常的血清學反應條件下帶有負電荷,形成水化層,成為新水膠體,因此,蛋白質(zhì)分子不會相互凝集或沉淀。
當抗原與抗體結(jié)合,使其表面電荷減少,水化層變薄,失去親水性能,抗原抗體復合物成為疏水膠體。在電解質(zhì)作用下,膠體粒子表面的電荷被中和,使疏水膠體進一步靠攏,形成可見的抗原抗體復合物。
第二節(jié) 抗原抗體反應的特點
一、特異性抗原表位與抗體超變區(qū)結(jié)合的特異性,是兩者在化學結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型上呈互補關(guān)系所決定的。這一特性,是應用于臨床診斷的基礎(chǔ)。
但某些天然抗原具有多種抗原表位,與另一物質(zhì)可能有共同抗原表位,對檢驗結(jié)果產(chǎn)生交叉反應。
二、可逆性抗原抗體是非共價結(jié)合,故不牢固,是一種動態(tài)平衡過程??乖贵w的親合力及反應條件(如離子強度、pH等)可影響解離。
親和層析法就是利用這個原理來純化抗原或抗體。
三、比例性抗原抗體比例合適時,沉淀物形成快而多,稱為抗原抗體反應的等價帶;若抗原或抗體極度過剩則無沉淀形成,稱為帶現(xiàn)象,抗體過量時,稱為前帶,抗原過量時,稱為后帶。
四、階段性抗原抗體反應可分為兩個階段。
第一階段:抗原與抗體特異性結(jié)合階段,此階段僅需幾秒至幾分鐘,但不出現(xiàn)可見反應。
第二階段:可見反應階段,此階段需要數(shù)分鐘至數(shù)小時。
反應過程受到反應條件(如溫度、pH、電解質(zhì)、抗原抗體比例等)的影響。
第三節(jié) 影響抗原抗體反應的因素
一、反應物自身因素
1.抗體:濃度、特異性、親和性和等價帶的寬窄都影響抗原抗體反應。
應選擇高特異性、高親合力的抗體作為診斷試劑。但單克隆抗體不適用于沉淀反應。
2.抗原:理化性狀、分子量、抗原表位的種類及數(shù)目均可影響反應結(jié)果。
顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應,可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應,單價抗原與相應抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。
二、環(huán)境因素
1.電解質(zhì):抗原抗體反應時常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。
2.酸堿度:抗原抗體反應一般在pH6~9之間進行。
3.溫度:一般為15~40℃,常用反應溫度為37℃,如高于56℃,可導致已結(jié)合的抗原抗體解離,甚至變性或破壞。
4.振蕩:適當振蕩也可加速反應。
第四節(jié) 免疫學檢測技術(shù)的類型
免疫學檢測技術(shù)的基礎(chǔ)是抗原抗體反應。
早期包括:凝集現(xiàn)象、沉淀現(xiàn)象、溶血現(xiàn)象等。
免疫組織化學技術(shù)、免疫測定、放射免疫技術(shù)、熒光免疫技術(shù)、酶免疫技術(shù)、化學發(fā)光免疫技術(shù)和金免疫技術(shù)等。
還有一組小測試,來試試自己掌握了多少吧!
1. 抗原抗體反應不包括
A.特異性
B.比例性
C.可逆性
D.多價性
E.電離性
2. 可以用已知抗原或抗體檢測相應的抗體或抗原,是由于抗原抗體反應的
A.特異性
B.比例性
C.可逆性
D.多價性
E.電離性
3. 抗原抗體反應需要合適的溫度才有利于二者結(jié)合,其范圍一般為
A.4~10℃
B.11~15℃
C.16~20℃
D.15~40℃
E.41~50℃
4.不是影響抗原抗體反應的因素是
A.溫度
B.電解質(zhì)
C.pH
D.適當振蕩
E.隔絕空氣
5.不屬于抗原抗體反應的是
A.PCR技術(shù)
B.免疫電泳技術(shù)
C.酶聯(lián)免疫技術(shù)
D.免疫比濁技術(shù)
E.放射免疫技術(shù)
答案:EADEA
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