流式細(xì)胞儀分析中熒光測(cè)量的應(yīng)用
流式細(xì)胞儀分析中熒光測(cè)量的應(yīng)用,快來跟著小編了解一下吧!
熒光信號(hào)由被檢細(xì)胞上標(biāo)記的特異性熒光染料受激光激發(fā)后產(chǎn)生,發(fā)射的熒光波長與激發(fā)光波長不相同。每種熒光染料都有特定的激發(fā)波長,激發(fā)后又產(chǎn)生特定波長熒光。通過一些波長選擇通透性濾光片,可將不同波長的散射光、熒光信號(hào)區(qū)分開。選擇不同的單克隆抗體及熒光染料可以利用流式細(xì)胞儀同時(shí)測(cè)定一個(gè)細(xì)胞上的多個(gè)不同特征。
(一)熒光信號(hào)測(cè)量與放大器
線性放大器用于測(cè)量信號(hào)強(qiáng)度變化范圍較小的信號(hào)或具有生物學(xué)線性過程的信號(hào),如前向散射光的測(cè)量與CD3+細(xì)胞DNA指數(shù)的測(cè)量。
對(duì)數(shù)放大器用于測(cè)量信號(hào)強(qiáng)度變化范圍較大且其光譜信號(hào)較復(fù)雜的信號(hào),在免疫測(cè)量中最常使用。
(二)熒光補(bǔ)償
依靠濾光片是不能完全阻擋干擾信號(hào),在每兩種熒光的發(fā)射光信號(hào)中仍有不可避免的重疊現(xiàn)象。該重疊區(qū)越大,信號(hào)檢測(cè)的準(zhǔn)確性越差。通常采用熒光補(bǔ)償?shù)姆椒▉硐丿B信號(hào),保證檢測(cè)信號(hào)的準(zhǔn)確性。
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