流式細(xì)胞儀分析技術(shù)中熒光測(cè)量如何進(jìn)行呢
流式細(xì)胞儀分析技術(shù)中熒光測(cè)量如何進(jìn)行呢?為了幫助更多考生了解,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)為大家搜集整理如下:
熒光信號(hào)由被檢細(xì)胞上標(biāo)記的特異性熒光染料受激光激發(fā)后產(chǎn)生,發(fā)射的熒光波長(zhǎng)與激發(fā)光波長(zhǎng)不相同。每種熒光染料都有特定的激發(fā)波長(zhǎng),激發(fā)后又產(chǎn)生特定波長(zhǎng)熒光。通過(guò)一些波長(zhǎng)選擇通透性濾光片,可將不同波長(zhǎng)的散射光、熒光信號(hào)區(qū)分開(kāi)。選擇不同的單克隆抗體及熒光染料可以利用流式細(xì)胞儀同時(shí)測(cè)定一個(gè)細(xì)胞上的多個(gè)不同特征。
(一)熒光信號(hào)測(cè)量與放大器
線性放大器用于測(cè)量信號(hào)強(qiáng)度變化范圍較小的信號(hào)或具有生物學(xué)線性過(guò)程的信號(hào),如前向散射光的測(cè)量與CD3+細(xì)胞DNA指數(shù)的測(cè)量。
對(duì)數(shù)放大器用于測(cè)量信號(hào)強(qiáng)度變化范圍較大且其光譜信號(hào)較復(fù)雜的信號(hào),在免疫測(cè)量中最常使用。
(二)熒光補(bǔ)償
依靠濾光片是不能完全阻擋干擾信號(hào),在每?jī)煞N熒光的發(fā)射光信號(hào)中仍有不可避免的重疊現(xiàn)象。該重疊區(qū)越大,信號(hào)檢測(cè)的準(zhǔn)確性越差。通常采用熒光補(bǔ)償?shù)姆椒▉?lái)消除重疊信號(hào),保證檢測(cè)信號(hào)的準(zhǔn)確性。
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