醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編整理了血清蛋白醋酸纖維素膜電泳的具體操作如下，請各位考生仔細(xì)查看。

1.醋纖膜剪成2×8㎝大小，用鉛筆在一端標(biāo)號；

2.電泳液：巴比妥-巴比妥鈉緩沖液（稱取巴比妥2.21克，巴比妥鈉12.36克，溶于1000ml水中）；

3.醋纖膜浸于電泳液中20min左右，夾于潔凈濾紙中，吸去多余的緩沖液；

4.將醋纖膜毛面向上貼于電泳槽支架上拉直，用邊緣整齊的玻片沾取少量無溶血血清，按壓于醋纖膜標(biāo)號一端約2㎝處，注意與膜的邊緣保持一定距離，待血清滲入膜后，濾紙上吸去多余血清；

5.反轉(zhuǎn)醋纖膜，使光面朝上貼于電泳槽中紗布兩端，使其自然充滿緩沖液，稍待片刻；

6.接通電源，注意正負(fù)極切勿接錯(cuò)，電壓90～150V，電流0.4～0.6mA/㎝，通電45分鐘（冬季時(shí)間稍長60min）；

7.關(guān)閉電源，取出醋纖膜染色；

8.染色：氨基黑10b染色液（稱取氨基黑10B0.1克，溶于無水乙醇20ml中，加冰醋酸5ml溶解；另取磺基水楊酸2.5克，溶于74.5ml水中；將二者混合搖勻即可）染色8min；

9.漂洗：漂洗液（甲醇45ml、冰醋酸5ml與水50ml混勻）中漂去多余的染料，直至背景無色為止；

10.洗脫，將漂洗干凈的醋纖膜吸干，剪下各染色的蛋白區(qū)帶放入相應(yīng)的試管中，同時(shí)剪下與白蛋白寬度相當(dāng)?shù)目瞻讌^(qū)帶作空白對照，在白蛋白管內(nèi)加0.4mol/L氫氧化鈉6ml（吸光度值×2），其余各管中加入3ml，振搖數(shù)次，置于37℃水溫箱中20min，使其染料浸出；

11.比色：620nm處讀取各管吸光度值，然后計(jì)算出各自的含量；

12.計(jì)算：吸光度值相加得總和，然后計(jì)算各自的吸光度值所占總吸光度值的百分比即為各自蛋白質(zhì)的百分含量。

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