確定白喉棒狀桿菌是否產(chǎn)生毒素的依據(jù)是

A.奈瑟染色有異染顆粒

B.呂氏斜面快速長(zhǎng)出灰白菌落

C.亞碲酸鉀平板呈黑色菌落

D.錫克試驗(yàn)

E. Elek平板試驗(yàn)

【提問】平板實(shí)驗(yàn)是什么意思？

【回答】答復(fù)：瓊脂平板毒力試驗(yàn)

瓊脂平板毒力試驗(yàn)：又稱 Elek平板毒力試驗(yàn)。將待檢菌和對(duì)照產(chǎn)毒菌用平行劃線法接種。平板中垂直鋪一條浸有白喉抗毒素的濾紙片。溫箱孵育 24～48小時(shí)，若待檢菌能產(chǎn)生相應(yīng)外毒素，則在濾紙條和長(zhǎng)出的菌苔交界處出現(xiàn)白色沉淀線。此為毒力試驗(yàn)陽性

【追問】B選項(xiàng)怎么解釋？

【回答】答復(fù)：您好，根據(jù)本題的要求及您的提問，我做出以下相關(guān)知識(shí)解答，希望對(duì)您的學(xué)習(xí)有所幫助，謝謝

白喉棒狀桿菌(C. diphtheriae)屬于棒狀桿菌屬,俗稱白喉?xiàng)U菌,是白喉的病原菌.

生物學(xué)性狀

1.形態(tài)與染色 菌體細(xì)長(zhǎng)微彎,一端或兩端膨大呈棒狀,排列不規(guī)則,常呈V和L等文字狀.革蘭染色陽性,用美藍(lán)短時(shí)間染色菌體著色不均勻,出現(xiàn)有深染的顆粒.用Albert等法染色,這些顆粒與菌體著染顏色不同,稱為異染顆粒,為本菌形態(tài)的主要特征,具有鑒別意義. 白喉棒狀桿菌的異染顆粒

2.培養(yǎng)特性與生化反應(yīng) 營(yíng)養(yǎng)要求高,需氧或兼性厭氧,在含有凝固血清的呂氏血清斜面上生長(zhǎng)良好.分離培養(yǎng)時(shí)常用鑒別選擇培養(yǎng)基即含0.03%～0.04%亞碲酸鉀的血平板.亞碲酸鉀能抑制雜菌,且白喉棒狀桿菌能吸收亞碲酸鹽使其還原為元素碲,菌落呈黑色.

3.抵抗力 白喉棒狀桿菌對(duì)濕熱敏感,煮沸1min或加熱60℃10min可致死.但對(duì)干燥和寒冷抵抗力強(qiáng).在衣服,床單,玩具上可存活數(shù)天至數(shù)周.5%石炭酸中1min,3%來蘇中10min死亡.對(duì)青霉素,紅霉素及廣譜抗生素敏感,對(duì)磺胺類藥物不敏感.

致病性

1.致病物質(zhì)

·索狀因子 是白喉棒狀桿菌表面的毒性糖脂,與結(jié)核分枝桿菌的索狀因子結(jié)構(gòu)和作用相似.

·白喉毒素 是白喉?xiàng)U菌的主要致病物質(zhì).此毒素是外毒素,由A,B兩個(gè)亞單位組成,A亞單位為毒素的活性中心,可使細(xì)胞內(nèi)延伸因子2(elongation factor –2, EF-2)滅活,影響蛋白質(zhì)的合成,從而使細(xì)胞變性和壞死.B亞單位是毒素與敏感細(xì)胞膜受體結(jié)合的部位.

白喉毒素并非由白喉分枝桿菌基因編碼合成,而是由β-棒狀噬菌體毒素基因(tox+)編碼的.只有帶有β-棒狀噬菌體的溶原性白喉棒狀桿菌才能產(chǎn)生白喉毒素.細(xì)菌失去該噬菌體即失去產(chǎn)毒能力.

2.所致疾病

白喉棒狀桿菌存在于患者及帶菌者的鼻咽腔中,隨飛沫或污染的物品傳播,易感者主要是兒童,多在秋冬季節(jié)流行.感染后細(xì)菌在鼻咽部粘膜上繁殖并產(chǎn)生毒素,引起局部炎癥及全身中毒癥狀.細(xì)菌和毒素可使局部粘膜上皮細(xì)胞壞死,血管擴(kuò)張,炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),纖維蛋白滲出,形成灰白色膜狀物,稱為假膜.此假膜與粘膜下組織緊密相連不易拭去.若假膜擴(kuò)展至氣管,支氣管粘膜,此處假膜易脫落阻塞氣道而窒息,是白喉早期致死的主要原因.一般細(xì)菌不入血,但可形成毒血癥,毒素與易感組織結(jié)合,在臨床上引起各種表現(xiàn),如心肌炎,軟腭麻痹,聲嘶,腎上腺功能障礙等.約2/3患者的心肌受損,多發(fā)生在病后2周～3周,成為白喉晚期致死的主要原因.

微生物學(xué)檢查

用無菌棉拭采取假膜邊緣處分泌物或帶菌者鼻咽腔分泌物送檢.

1.直接涂片鏡檢 將標(biāo)本直接涂片,用美藍(lán)或Albert法染色后鏡檢.若找到有異染顆粒的棒狀桿菌,根據(jù)形態(tài),排列特征,結(jié)合臨床即可初步診斷.

2.分離培養(yǎng) 將棉拭取材接種于呂氏血清斜面,經(jīng)37℃6～12h增菌后作染色鏡檢,有助于快速診斷.也可將棉拭標(biāo)本或呂氏血清斜面上可疑菌落接種于亞碲酸鉀血平板上,37℃培養(yǎng),取菌落涂片染色鏡檢和毒力試驗(yàn).

3.毒力試驗(yàn) 是鑒定產(chǎn)毒白喉棒狀桿菌與其它棒狀桿菌的重要試驗(yàn),檢測(cè)方法有瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)和動(dòng)物試驗(yàn).后者常用豚鼠作體內(nèi)中和試驗(yàn),取體重約250g的豚鼠2只,其中1只于試驗(yàn)前12h預(yù)先從腹腔注射白喉抗毒素250～500單位作為對(duì)照.然后2只豚鼠均于皮下注射待檢菌的48h培養(yǎng)液2ml,觀察2 d～4d,若試驗(yàn)動(dòng)物死亡,而對(duì)照動(dòng)物存活,說明待檢菌株為產(chǎn)毒菌株.

【追問】錫克試驗(yàn)是什么？

【回答】答復(fù)：您好！

錫克試驗(yàn)的臨床應(yīng)用及意義：

對(duì)白喉具有免疫力的人，血清內(nèi)含有白喉抗毒素，能中和白喉外毒素，消除其對(duì)組織的損害。皮內(nèi)注入定量的白喉毒素，根據(jù)皮膚反應(yīng)，可了解被試者對(duì)白喉的免疫狀態(tài)，故錫克試驗(yàn)又稱白喉毒素試驗(yàn)。試驗(yàn)時(shí)皮內(nèi)注入白喉毒素0.1ml，以同量加熱破壞的毒素作為對(duì)照，觀察結(jié)果。

1.陰性反應(yīng) 血清中因含有足量的抗毒素抗體，能中和注入的毒素，對(duì)一般接觸感染有免疫力。

2.陽性反應(yīng) 說明受試者無免疫力，其血循環(huán)中抗毒素很少或無。

3.假陽性反應(yīng) 表示受試者有免疫力，但對(duì)毒素或其它雜質(zhì)有變態(tài)反應(yīng)。常見于成人或年齡較大的兒童。

4.混合反應(yīng) 指示受試者無免疫力，其血循環(huán)中抗毒素水平低或無，而且受試者對(duì)毒素或試劑內(nèi)其它蛋白質(zhì)有變態(tài)反應(yīng)。以居住在白喉流行區(qū)的無免疫人群最多見。

錫克試驗(yàn)可用于調(diào)查人群對(duì)白喉有無免疫力，凡陽性者均應(yīng)給予白喉類毒素人工免疫，并用本試驗(yàn)測(cè)定其免疫效果。

如癌癥病人厭油膩葷腥，可換些蛋白質(zhì)含量豐富的非肉類食物，如豆類食品等；搓耳朵：雙手分別搓捏兩耳廓和內(nèi)外部，有痛點(diǎn)處為捏的重點(diǎn)，從上到下要全部搓摩，在耳垂處手法不妨重一些，搓熱搓紅。常做耳部按摩，有強(qiáng)腎之功。

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★問題所屬科目：臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師---醫(yī)學(xué)微生物學(xué)