生物體中有些化學(xué)成分在短波譜線照射下自發(fā)地激發(fā)熒光，叫自發(fā)熒光(Primaryfluorescence)。例如某些種類的維生素(A,B2)，生物色素，類脂質(zhì)，彈力纖維等.自發(fā)熒光在顯微鏡下的顯色效應(yīng)和顯像效應(yīng)均很微弱，而且顯像時(shí)間也短。生物標(biāo)本用熒光色素處理之后，在短波譜線照射下可以激發(fā)出輝煌的熒光，叫次發(fā)熒光，次發(fā)熒光的顯色效應(yīng)和顯像效應(yīng)極為強(qiáng)烈。因此它在熒光顯微鏡技術(shù)中占據(jù)最重要位置?，F(xiàn)今的熒光顯微鏡技術(shù)中合成更有效的熒光色素，開發(fā)更具特異性的標(biāo)記技術(shù)，熒光色素與激發(fā)光波長(zhǎng)間的變量關(guān)系，熒光強(qiáng)度的定量測(cè)定以及染色體分染熒光掃描分類等等都是重大探索的方向。