第一章總則

第一條為加強本市二級生物安全防護實驗室生物安全管理，防止病原微生物通過實驗室向外環(huán)境擴散和實驗室感染，保護公眾和實驗室工作人員的健康，根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》、《病原微生物實驗室生物安全管理條例》、《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2008）等有關(guān)法律法規(guī)制定本規(guī)范。

第二條本規(guī)范所指的二級生物安全防護實驗室（BSL-2實驗室，以下簡稱實驗室）是指從事衛(wèi)生部《人間傳染的病原微生物名錄》（下稱《名錄》）中所規(guī)定的適用于二級生物安全防護等級的病原微生物相關(guān)實驗活動的場所。

本規(guī)范所指的實驗活動是指實驗室從事《名錄》中規(guī)定的適用于二級生物安全防護等級的病原微生物菌（毒）種或樣本有關(guān)的研究、教學、檢測、診斷等活動。

第三條本規(guī)范適用于本市行政區(qū)域內(nèi)的與人體健康有關(guān)的二級生物安全防護實驗室及其實驗活動。

第四條本市二級生物安全防護實驗室實行“預(yù)防為主、單位負責、突出重點、保障安全”的管理原則。

第二章管理要求

第一節(jié)組織管理

第五條實驗室設(shè)立單位負責本單位實驗室的生物安全管理，負責建立本單位生物安全管理體系和管理制度，落實生物安全管理責任部門或責任人；定期召開生物安全管理會議，對實驗室生物安全重大事項作出決策；批準和發(fā)布實驗室生物安全手冊、風險評估等重要文件；加強實驗室日?；顒拥墓芾磲t(yī)`學教育網(wǎng)整理，對生物安全規(guī)定的落實情況進行檢查等。

實驗室設(shè)立單位的法人代表應(yīng)對本單位實驗室生物安全負責。

第六條實驗室設(shè)立單位應(yīng)設(shè)立生物安全管理委員會，負責組織專家對實驗室生物安全進行咨詢、指導、評估和監(jiān)督等相關(guān)事宜。

第七條實驗室生物安全管理責任部門的主要職責為：

（一）負責組織制（修）訂和實施實驗室生物安全手冊、生物安全規(guī)章制度、操作規(guī)范和標準操作規(guī)程，對研究方案進行審查和風險評估，并提出風險控制的措施；

（二）監(jiān)督實驗室生物安全管理體系的落實，負責本單位實驗室生物安全防護，病原微生物菌（毒）種或樣本的保存、使用以及銷毀等，實驗室生物安全操作，實驗室排放廢氣、廢水、廢棄物處置和消毒滅菌等規(guī)章制度實施情況進行監(jiān)督、檢查，并評估實施效果；

（三）負責監(jiān)督實驗室工作人員健康狀況和健康監(jiān)測的開展；

（四）組織生物安全知識培訓和演練，并評估效果；

（五）負責制訂生物安全應(yīng)急處置預(yù)案。

第八條實驗室負責人為實驗室生物安全第一責任人，其主要職責為：

（一）全面負責實驗室生物安全工作；

（二）決定并授權(quán)進入實驗室的工作人員；

（三）督促有關(guān)法律法規(guī)、生物安全規(guī)章制度和生物安全操作規(guī)程的執(zhí)行，糾正違規(guī)行為并有權(quán)作出停止實驗的決定；

（四）任命實驗室生物安全管理員具體落實實驗室生物安全管理工作；

（五）負責培訓和實施實驗室生物安全應(yīng)急處置預(yù)案；

（六）負責實驗室安全事故的現(xiàn)場處置和調(diào)查，并將調(diào)查結(jié)果以及處理意見向設(shè)立單位生物安全管理責任部門或責任人報告；

（七）負責制定涉及感染性物質(zhì)的研究計劃、方案、操作程序、風險評估報告、安全及應(yīng)急措施、項目組人員培訓及健康監(jiān)督計劃、安全保障和資源要求等；

（八）負責實施實驗室工作人員健康監(jiān)護。

第九條實驗室生物安全管理員的主要職責為：

（一）負責實驗室生物安全保障以及技術(shù)規(guī)章方面的具體指導；

（二）負責對菌（毒）種或樣本運輸管理、技術(shù)方法、程序、設(shè)施和設(shè)備進行日常的安全檢查；

（三）糾正違反生物安全操作規(guī)程的行為；

（四）在出現(xiàn)潛在感染性物質(zhì)溢出或其他事故時，及時報告處置并協(xié)助事故調(diào)查；

（五）檢查和監(jiān)督實驗室廢棄物的有效管理與安全處置；

（六）檢查和監(jiān)督實驗室各項消毒滅菌措施的落實情況。

第十條實驗室應(yīng)建立健全生物安全管理制度，編寫生物安全手冊，手冊應(yīng)包括（但不限于）以下內(nèi)容：

（一）實驗室生物安全管理體系；

（二）生物因子生物危害評估；

（三）實驗室人員和項目準入制度；

（四）生物危險標識使用規(guī)定；

（五）實驗室人員生物安全行為規(guī)范醫(yī)`學教育網(wǎng)整理；

（六）實驗室生物安全應(yīng)急處置預(yù)案（包括泄漏處理、人員意外傷害、設(shè)施設(shè)備失效等應(yīng)急處置預(yù)案）；

（七）實驗活動生物安全標準操作規(guī)程；

（八）人員健康監(jiān)護制度；

（九）事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報告制度；

（十）生物安全檢查制度；

（十一）人員培訓考核制度；

（十二）實驗室內(nèi)務(wù)管理制度；

（十三）實驗室菌（毒）種或樣本安全保管、使用、銷毀和檔案管理制度；

（十四）菌（毒）種或樣本外送檢測和運輸管理制度；

（十五）實驗室廢棄物管理制度；

（十六）實驗室消毒隔離制度；

（十七）生物安全柜的使用和維護管理制度；

（十八）其他必要的管理性和技術(shù)性文件。

第二節(jié)備案

第十一條在建設(shè)實驗室或開展實驗活動之前，實驗室設(shè)立單位的生物安全責任部門或責任人應(yīng)組織相關(guān)專業(yè)人員依照衛(wèi)生部《名錄》對擬操作的生物因子的危害程度、實驗活動的危險性、氣溶膠傳播的可能性、預(yù)防治療的獲得性、防護屏障的安全性、應(yīng)急預(yù)案的有效性等因素進行風險評估，確定相應(yīng)的生物安全防護水平等級。

第十二條新建、改建或者擴建的實驗室應(yīng)當向所在區(qū)縣的衛(wèi)生行政部門備案。

第十三條實驗室向所在區(qū)縣衛(wèi)生行政部門備案時，實驗室設(shè)施設(shè)備應(yīng)具備以下條件：

（一）可以設(shè)置在共用建筑物內(nèi)，但應(yīng)相對獨立，入口處應(yīng)有二級生物安全防護水平實驗室標識、標明負責人、聯(lián)系電話。

（二）實驗室的門應(yīng)有可視窗，并應(yīng)可自動關(guān)閉；實驗室主入口的門應(yīng)有進入控制措施。

（三）實驗室布局應(yīng)合理，設(shè)置清潔區(qū)、緩沖區(qū)和實驗操作區(qū)，實驗室的人流、物流應(yīng)避免交叉。

（四）墻壁、天花板和地面應(yīng)平整、不滲水、易清潔并耐化學品和消毒劑的腐蝕。實驗臺和櫥柜應(yīng)牢固穩(wěn)定，實驗臺面防水、耐腐蝕、耐熱、易消毒。

（五）實驗室必須設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近實驗操作區(qū)出口處，洗手龍頭應(yīng)為自動感應(yīng)式、長手柄式或腳踏式，備有洗手消毒皂液，必要時配備快速手消毒液。

（六）實驗室可以利用自然通風。如果采用機械通風，必須避免交叉污染，不宜與大樓共用公共的中央空調(diào)系統(tǒng)。

（七）如有可開啟式窗戶，應(yīng)安裝可防蚊蟲的紗窗。

（八）應(yīng)在實驗操作區(qū)配備生物安全柜。

（九）應(yīng)按產(chǎn)品的設(shè)計要求安裝和使用生物安全柜。如果生物安全柜的排風在室內(nèi)循環(huán)，室內(nèi)應(yīng)具備通風換氣的條件；如果使用需要管道排風的生物安全柜，應(yīng)通過獨立于建筑物其他公共通風系統(tǒng)的管道排出。

（十）實驗操作區(qū)內(nèi)應(yīng)配備洗眼裝置，必要時應(yīng)設(shè)緊急噴淋裝置。

（十一）應(yīng)在實驗室或其所在的建筑內(nèi)配備高壓蒸汽滅菌器或其他適當?shù)南緶缇O(shè)備，所配備的消毒滅菌設(shè)備應(yīng)以風險評估為依據(jù)。

（十二）室內(nèi)應(yīng)有空氣和物體表面消毒的設(shè)備或設(shè)施醫(yī)`學教育網(wǎng)整理。

第十四條BSL-2實驗室向所在區(qū)縣的衛(wèi)生行政部門備案時應(yīng)提交以下材料：

（一）備案登記表；

（二）設(shè)立單位法人資格證明資料（復(fù)印件）；

（三）實驗室平面布局圖；

（四）實驗室從事涉及病原微生物檢驗的項目或病原體名稱；

（五）實驗室基本情況一覽表；

（六）承諾書；

（七）其他資料。

第十五條各區(qū)縣衛(wèi)生行政部門應(yīng)當對實驗室提交的備案申請材料及時審查，對申請材料不齊全或者不符合法定形式的，應(yīng)當在5日內(nèi)出具申請材料補正通知書；申請材料齊全且符合法定形式的，應(yīng)當在20日內(nèi)作出備案登記決定。

第三節(jié)實驗室管理

第十六條實驗室或?qū)嶒炇以O(shè)立單位應(yīng)建立工作人員生物安全上崗考核制度和培訓檔案。所有與實驗活動相關(guān)的人員都應(yīng)經(jīng)過生物安全培訓并經(jīng)考核合格后方可上崗，取得上崗資格的人員每年應(yīng)接受培訓。實驗室負責人應(yīng)通過市衛(wèi)生行政部門組織的生物安全培訓，并考核合格。

培訓對象應(yīng)包括實驗室管理人員、操作人員、樣本運輸人員、消毒工作人員、廢棄物處置人員、儀器設(shè)備維修人員、外來進修人員等實驗室全體工作人員。

培訓內(nèi)容應(yīng)包括實驗室生物安全的基本知識、基本技能和應(yīng)急處置預(yù)案、生物危險和實驗室感染預(yù)防、菌（毒）種或樣本管理、廢棄物處置、消毒隔離與職業(yè)個人防護等。

第十七條實驗室應(yīng)每年對實驗人員開展與其從事實驗活動相關(guān)的健康體檢并建立人員健康檔案，必要時進行免疫接種。實驗室工作人員應(yīng)在身體狀況良好的情況下進入操作區(qū)工作，若出現(xiàn)疾病、過度疲勞或其他意外狀況，不宜進入操作區(qū)。

第十八條對可能使病原微生物及其毒素濺出或產(chǎn)生氣溶膠的操作，應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進行；如無法在生物安全柜內(nèi)進行而必須采取外部操作時，應(yīng)加裝負壓罩。

生物安全柜的型號應(yīng)根據(jù)實驗的項目和對象確定。生物安全柜的使用應(yīng)做好使用記錄，包括開機時間、使用時間、消毒方法及時間。

生物安全柜安裝后、移位后、更換高效過濾器后應(yīng)對其生物安全性能進行檢測，正常使用后每年必須由具有專項資質(zhì)的第三方進行檢測，保存檢測記錄。檢測不合格的應(yīng)立即停止使用，并進行維修。

第十九條對會產(chǎn)生氣溶膠或高濃度或大容量感染性物質(zhì)進行離心、混勻、超生霧化和劇烈攪拌等，應(yīng)使用密封的離心機轉(zhuǎn)子、安全的離心杯或樣本儲存容器，在生物安全柜或負壓罩中開閉、裝載和操作。

第二十條禁止非工作人員進入實驗室。特殊情況下，非工作人員進入實驗室須經(jīng)實驗室負責人批準，由專人陪同，并做好登記。

第二十一條進出實驗應(yīng)更換工作服，操作時應(yīng)佩戴手套、戴防護帽和口罩，必要時使用面部保護裝置。當防護用品破損或污染物潑濺時應(yīng)立即更換。應(yīng)著防護工作鞋。每次實驗結(jié)束后和離開實驗室前應(yīng)及時洗手和消毒。

第二十二條實驗室應(yīng)配備足夠的個人防護用品并有專柜存放。

第二十三條實驗操作區(qū)禁止存放食品、飲料及其他非實驗用品。

第二十四條實驗室檢測報告，應(yīng)采用電子通訊方式在清潔區(qū)打印、發(fā)放，如沒有條件，檢測報告必須消毒后發(fā)放。

第二十五條實驗室應(yīng)根據(jù)實驗活動的類型，生物因子的種類、污染程度和被消毒物品的特性選擇可靠的消毒方法。

應(yīng)采用有效手段定期開展消毒效果監(jiān)測，并要作好書面記錄。

第二十六條實驗室實驗器材和廢棄物處置應(yīng)由專人負責。

實驗棄置的菌（毒）種或樣本、培養(yǎng)物和被污染的廢棄物必須在實驗室或其所在的建筑內(nèi)消毒滅菌，達到生物學安全后再按感染性廢棄物收集處理。

經(jīng)消毒滅菌后處理的廢棄物包裝必須符合《醫(yī)療廢物管理條例》的規(guī)定。

實驗廢棄物最終處置必須交由經(jīng)市環(huán)保部門資質(zhì)認定的醫(yī)療廢物處置單位集中處置。

實驗用非一次性個人防護用品和實驗器材，必須經(jīng)過消毒滅菌后方可清洗。運送過程中應(yīng)防止有害生物因子的擴散。

第二十七條實驗室空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)定期維護、清洗消毒，并有書面記錄。

第二十八條實驗室必須執(zhí)行法定傳染病的報告，定期開展生物安全突發(fā)事件的應(yīng)急處置演練工作。

第二十九條實驗室應(yīng)建立實驗檔案，記錄實驗室使用情況和安全監(jiān)督情況醫(yī)`學教育網(wǎng)整理。保存期限符合國家有關(guān)法律法規(guī)或標準的要求。

第四節(jié)病原微生物菌（毒）種或樣本管理

第三十條樣本采集人員應(yīng)掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能，并具有與采集病原微生物樣本危害等級相適應(yīng)的生物安全防護裝備和防止擴散污染的措施。

樣本采集人員應(yīng)做好對樣本的來源、采集時間、檢測內(nèi)容、采集人等的記錄。

第三十一條實驗室應(yīng)制定病原微生物菌（毒）種或樣本運輸?shù)闹贫群统绦?，包括實驗室?nèi)部、單位內(nèi)部和單位外部的運輸，必須符合有關(guān)規(guī)定；建立菌（毒）種或樣本接收和運出的清單，清單應(yīng)記錄菌（毒）種或樣本性質(zhì)、數(shù)量、交接時間、交接人、地點、狀態(tài)等項目，確保菌（毒）種或樣本出入的可追溯性。

第三十二條高致病性或疑似高致病性的病原微生物菌（毒）種或樣本運輸必須按《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》執(zhí)行。

第三十三條非高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸應(yīng)由專人負責，專車運送，不得通過公共交通工具運輸，護送人員應(yīng)經(jīng)過生物安全培訓，且考核合格方能上崗。運輸過程應(yīng)采取相應(yīng)的防護措施。

運輸?shù)陌b要求使用專用的生物樣本運送箱，外包裝應(yīng)有生物危險標簽、標識、警告用語、提示用語以及申請單位的名稱、地址、聯(lián)系人和聯(lián)系電話等。

運輸過程中發(fā)生意外狀況，運輸單位、護送人員、接收機構(gòu)應(yīng)按《病原微生物實驗室生物安全管理條例》中的有關(guān)規(guī)定，及時報告并采取嚴格的應(yīng)急處置措施。

單位內(nèi)部運輸樣本應(yīng)采用符合生物安全要求，且專用、密閉的包裝箱（盒），并張貼生物安全標識。

第三十四條實驗室不得保存高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本，保存非高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本應(yīng)符合相關(guān)規(guī)定，不得以任何理由向單位或個人提供菌（毒）種或樣本。

實驗室保存的菌（毒）種或樣本必須集中保存，專人負責，實行雙人雙鎖管理，并建立所儲存的菌（毒）種或樣本使用和銷毀記錄清單。

第三十五條保存的菌（毒）種或樣本應(yīng)建立專冊，詳細記錄名稱、編號、來源、入庫時間、使用記錄、流向等，專冊（卡）應(yīng)長期保存。

第三十六條實驗室應(yīng)建立菌（毒）種或樣本的銷毀制度并記錄完整，銷毀保存的菌（毒）種或樣本應(yīng)經(jīng)實驗室負責人批準，并在專冊上注銷并注明原因、時間、方法、數(shù)量、經(jīng)辦人等。

第三十七條病原微生物菌（毒）種或樣本的出入境，按照衛(wèi)生部和國家質(zhì)檢總局《關(guān)于加強醫(yī)用特殊物品出入境管理衛(wèi)生檢疫的通知》執(zhí)行。

第三章附則

第三十八條本規(guī)范自2012年10月1日起施行，有效期為五年。

第三十九條市衛(wèi)生局2006年9月19日頒布的《關(guān)于在本市開展病原微生物實驗室備案工作的通知》（滬衛(wèi)科教〔2006〕28號）、2006年10月17日頒布的《上海市一、二級病原微生物實驗室生物安全管理規(guī)范》（滬衛(wèi)科教〔2006〕34號）的有關(guān)規(guī)定與本規(guī)范不一致處，以本規(guī)范為準。

附錄一：病原微生物危害等級分類

本規(guī)范采用《病原微生物實驗室安全管理條例》的病原微生物危害等級分類方法，與《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2008）和WHO《實驗室生物安全手冊》的分類方法對應(yīng)關(guān)系見表1.

附錄二：生物安全柜選型原則

實驗室應(yīng)根據(jù)所需保護的實驗對象的類型；針對操作感染性物質(zhì)所需的個體防護要求；暴露于放射性核素和揮發(fā)性有毒化學品時的個體防護要求；或其他特殊性的工作要求來選擇生物安全柜的類型。一般在二級生物安全防護水平實驗室中主要使用Ⅱ級生物安全柜（A1型、A2型、B1型、B2型），常用的是A2型和B2型。生物安全柜的選型遵循原則見表2.

附錄三：消毒、滅菌方法的選擇和基本程序

一般根據(jù)物品的種類和污染后的危害程度來選擇消毒、滅菌方法。消毒首選物理方法，不能用物理方法消毒的方可選化學方法。

對于菌（毒）種、生物樣本、其他感染性材料和污染物等，應(yīng)選用高壓蒸汽滅菌法處理。

對于實驗防護服、實驗器具等，可選用高壓蒸汽滅菌、化學浸泡法處理。

對于實驗儀器，臺面和實驗室環(huán)境等，可選用化學消毒劑或紫外線照射的方法處理。但若有病原微生物污染時，應(yīng)采用更為有效的消毒法（如甲醛熏蒸等）。

對于被菌（毒）種、生物樣本或其他感染性材料污染的器材和物品應(yīng)先消毒后清洗，使用前再按物品危險性的種類，選擇適當?shù)南?、滅菌方法進行消毒或滅菌處理。

附錄四：消毒、滅菌效果監(jiān)測的方法及周期

實驗室必須對消毒、滅菌效果定期進行監(jiān)測。滅菌合格率必須達到100%，不合格的物品不得離開實驗室。

一、使用中的消毒劑、滅菌劑，應(yīng)進行生物和化學監(jiān)測。

生物監(jiān)測：消毒劑每季度一次，細菌總數(shù)必須<100cfu/mL，不得檢出致病微生物。

滅菌劑每月一次，不得檢出任何微生物。

化學監(jiān)測：應(yīng)根據(jù)消毒、滅菌劑的性能定期監(jiān)測，含氯消毒劑等應(yīng)每日監(jiān)測。

二、壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測。

高壓蒸汽滅菌應(yīng)進行工藝監(jiān)測、化學監(jiān)測和生物監(jiān)測。工藝監(jiān)測應(yīng)每鍋進行，并詳細記錄。化學監(jiān)測應(yīng)每包進行，對于高危險性物品需進行中心部位的化學監(jiān)測。預(yù)真空壓力滅菌器每天滅菌前進行B-D試驗，生物監(jiān)測應(yīng)每月進行，新滅菌器使用前必須先進行生物監(jiān)測，合格后方可使用。

三、紫外線消毒效果監(jiān)測

紫外線消毒應(yīng)進行燈管照射強度監(jiān)測和生物監(jiān)測。高強度紫外線不得低于90μw/cm2

燈管照射強度監(jiān)測每半年進行一次，不得低于70μw/cm2.新使用的燈管也要進行監(jiān)測，不得低于100μw/cm2

生物監(jiān)測必要時進行，要求經(jīng)消毒后的物品或空氣中的自然菌應(yīng)減少90.00%以上，人工染菌殺滅率應(yīng)達到99.90%.

四、環(huán)境監(jiān)測

環(huán)境監(jiān)測包括對空氣、儀器設(shè)備、物體表面和工作人員手的監(jiān)測。在懷疑有實驗室污染時應(yīng)進行環(huán)境監(jiān)測。監(jiān)測方法和衛(wèi)生標準見《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準》（GB15982-1995）。

附錄五：生物安全標識的使用

一、生物安全標識

凡是盛裝生物危害物質(zhì)的容器、運輸工具、進行生物危險物質(zhì)操作的儀器和專用設(shè)備等都必須粘貼標示有相應(yīng)危害級別的生物安全標識（見圖1）。

 圖1：生物安全標識

生物安全防護水平二級

注：標志為黑色，背景為黃色

二、生物安全標識的使用

在生物安全實驗室入口的明顯位置必須張貼生物危害標志。標志上應(yīng)明確標示實驗室生物安全水平等級，實驗室生物安全責任人、緊急聯(lián)系方式等。見圖2

 圖2：生物安全實驗室標識

二級生物安全實驗室授權(quán)人員方可進入

責任人：

緊急聯(lián)系電話：