概述

對黃連上清丸進(jìn)行顯微鑒定，檢出其主要組成藥物17種，避開交叉，排除干擾，描述各藥具鑒別價值的顯微特征，并繪圖。同時進(jìn)行薄層層析，檢出其中川芎和甘草，與顯微鑒定結(jié)論吻合，為黃連上清丸質(zhì)量控制提供參考。

顯微鑒定

1、黃連：a)石細(xì)胞：鮮黃色，類長方形，邊緣不平整，直徑約31 μm，長65 μm，壁厚10～14 μm，層紋明顯，紋孔小，孔溝細(xì)。b）韌皮纖維：鮮黃色，較粗短，紡錘形，末端鈍圓，長102～105 μm，直徑15～20 μm，壁厚，紋孔較稀，孔溝較粗。

2、梔子：a）種皮石細(xì)胞：淡黃色，類長方形，直徑約61 μm，長約112 μm，壁厚約24 μm，呈瘤狀伸入胞腔；孔溝較寬，末端常膨大呈囊狀；胞腔不規(guī)則，充滿棕色物。b）果皮表皮細(xì)胞：淡黃色，表面觀呈類長方形或方形，垂周壁稍厚，胞腔內(nèi)含棕色物。

3、連翹：石細(xì)胞，綠色，胞腔黃棕色，類長方形，直徑約34 μm，壁厚12～14 μm，長約71 μm，一側(cè)壁較薄。

4、蔓荊子：外果皮細(xì)胞，表面觀呈類多角形，表面具細(xì)密角質(zhì)條紋，可見圓形毛茸脫落痕。

5、防風(fēng)：a)油管：多破碎，管道中含黃棕色條塊狀分泌物，直徑約20 μm，周圍薄壁細(xì)胞細(xì)長而皺縮，細(xì)胞界限不明顯。b）韌皮薄壁細(xì)胞：縱長，末端漸尖，多不完整，直徑14～17 μm壁薄。

6、荊芥穗：a）非腹毛：基部直徑約17 μm，長約78 μm，壁稍厚，上部細(xì)胞具細(xì)小疣狀突起，下部一細(xì)胞有角質(zhì)縱條紋。b）果皮石細(xì)胞：黃色，表面觀呈類多角形，直徑約21 μm，垂周壁深波狀彎曲，紋孔稀疏。

7、白芷：草酸鈣簇晶，存在于薄壁細(xì)胞中，呈圓簇狀或類圓形，半透明，直徑7～9 μm。

8、黃芩：a）石細(xì)胞：淡黃色，呈橢圓形，直徑約37 μm，長68 μm，壁厚約11 μm，孔溝有的較寬。b）韌皮纖維：淡黃色，呈梭形，兩端稍鈍圓，長約68 μm，直徑約17 μm，壁甚厚，孔溝明顯。

9、菊花：花粉粒，黃色，類圓形，直徑24～25 μm，表面有網(wǎng)狀紋飾并有刺，刺長約3 μm。

10、薄荷：葉片碎片，下表皮細(xì)胞垂周壁彎曲，氣孔較多，副衛(wèi)細(xì)胞2個，直軸式。

11、大黃：草酸鈣簇晶，較大，直徑37～54 μm，棱角多明顯，短鈍。

12、黃柏：a）晶鞘纖維：鮮黃色，成束，直徑約24 μm，壁極厚，孔溝一般不明顯，胞腔線形。含晶細(xì)胞密集。b）石細(xì)胞：鮮黃色，呈不規(guī)則分枝狀，形大，長約149 μm，壁較薄，胞腔甚大，層紋明顯，孔溝較少。

13、桔梗：菊糖，用乙醇裝片，菊糖團(tuán)塊類圓形或不規(guī)則形，有的有放射狀紋理。

14、川芎：木栓細(xì)胞，黃棕色，表面觀呈類多角形或長方形，壁薄，微波狀彎曲。

15、旋覆花：a）冠毛：為多列性非腺毛，邊緣細(xì)胞稍向外突出。b）花粉粒：黃色，類球形，直徑約24 μm，外壁有刺，長約3 μm，具3個萌發(fā)孔。

16、甘草：晶鞘纖維，淡黃色，直徑約10 μm，壁極厚，孔溝不明顯，胞腔線形，包繞有含晶細(xì)胞。

17、石膏：晶體碎片，無色透明，纖維狀。

薄層色譜鑒別

1、川芎：樣品液：取黃連上清丸2丸（12 g），剪碎，加硅藻土18 g，研勻，加乙醚60 mL，超聲提取25 min，過濾，濾液揮干乙醚，殘渣以乙酸乙酯1 mL溶解，即得。

陰性對照液：按處方量自制缺川芎的成藥12 g，與樣品平行操作，同法制備。

川芎藥材對照液：取川芎藥材0.5 g，粉碎，加乙醚4 mL，之后與樣品同步提取，濾液揮干乙醚，殘渣加乙酸乙酯1 mL溶解，即得。

吸取川芎藥材對照液、樣品液、陰性對照溶各3 mL，分別點于同一高效硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（9∶1）為展開劑，以氨水堿化環(huán)境后展開，展距9 cm。取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。結(jié)果顯示：在樣品色譜中，與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上有兩個相同的亮藍(lán)色熒光斑點，而陰性對照色譜則無

2、甘草：樣品液：取黃連上清丸2丸（12 g），剪碎，加硅藻土18 g，研勻。加石油醚200 mL，加熱回流提取2 h，過濾，濾渣以50%的乙醇200 mL加熱回流提取3 h，過濾。取濾液50 mL濃縮至20 mL。取濃縮液5 mL，加水2.5 mL，以10%氨水堿化后用氯仿提取3次，每次10 mL。合并氯仿液，蒸干。殘渣用乙醇2 mL溶解，即得。

陰性對照液：按處方量自制缺甘草的成藥12 g，與樣品平行操作，同法制備。

甘草藥材對照液：取甘草藥材0.2 g，粉碎，加乙醚25 mL，之后與樣品同步提取，蒸干氯仿后，殘渣用乙醇2 mL溶解，即得。

甘草酸銨對照液：取甘草酸銨標(biāo)準(zhǔn)品2 mg，加乙醇 1 mL溶解，即得。

吸取甘草酸銨對照液、甘草藥材對照液、樣品液、陰性對照液各3 μL，分別點于同一高效硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（6∶1∶3）為展開劑，展開，展距9 cm，取出，晾干，以1%碘的四氯化碳溶液噴霧顯色，烘至斑點顯色清晰。在日光下觀察，結(jié)果顯示：樣品色譜中，與甘草酸銨色譜相應(yīng)的位置上有一相同的黃色斑點；與甘草藥材色譜相應(yīng)的位置上有3個相同的黃色斑點，而陰性對照色譜則無。