輔助檢查

一、血常規(guī)及生化檢查

由于失水引起紅細胞、血紅蛋白及紅細胞壓積增高，白細胞計數(shù)10～20×109/L或更高，中性粒細胞及大單核細胞增多。血清鉀、鈉、氯化物和碳酸鹽均降低，血pH下降，尿素氮、肌酐升高。治療前由于細胞內(nèi)鉀離子外移，血清鉀可在正常范圍內(nèi)，當酸中毒糾正后，鉀離子移入細胞內(nèi)而出現(xiàn)低鉀血癥。

二、尿常規(guī)

可有蛋白、紅白細胞及管型。尿比重為1.010～1.025之間。

三、血清學檢查

血清凝集試驗。在發(fā)病第1～3日及第10～15日各取1份血清，若第2份血清的抗體效價比第1份增高4倍或4倍以上，有診斷參考價值。

四、病原菌檢查

1、涂片染色 取糞便或早期培養(yǎng)物涂片作革蘭染色鏡檢，可見革蘭陰性稍彎曲的弧菌。

2、懸滴檢查 將新鮮糞便作懸滴或暗視野顯微鏡檢，可見運動活潑呈穿梭狀的弧菌。

3、制動試驗 取急性期病人的水樣糞便或堿性胨水增菌培養(yǎng)6小時左右的表層生長物，先作暗視野顯微鏡檢，觀察動力。如有穿梭樣運動物時，則加入O1群多價血清一滴，若是O1群霍亂弧菌，由于抗原抗體作用，則凝集成塊，弧菌運動即停止。如加O1群血清后，不能制止運動，應(yīng)再用O139血清重作試驗。

4、增菌培養(yǎng) 所有懷疑霍亂患者糞便，除作顯微鏡檢外，均應(yīng)作增菌培養(yǎng)。留取使用抗菌藥物之前糞便，盡快送到實驗室培養(yǎng)。培養(yǎng)基一般用pH8.4的堿性蛋白胨水，36～37℃培養(yǎng)6～8小時后表面能形成菌膜。此時應(yīng)進一步作分離培養(yǎng)，并進行動力觀察和制動試驗，這將有助于提高檢出率和早期診斷。

5、分離培養(yǎng) 用慶大霉素瓊脂平皿或堿性瓊脂平板。前者為強選擇性培養(yǎng)基，在36～37℃條件下，培養(yǎng)8～10小時霍亂弧菌即可長成小菌落。后者則需培養(yǎng)10～20小時。選擇可疑或典型菌落，應(yīng)用霍亂弧菌“O”抗原的抗血清作玻片凝集試驗。

6、核酸檢測 通過PCR技術(shù)檢測霍亂弧菌毒素基因亞單位CtxA和毒素協(xié)同菌毛基因（TcpA）來區(qū)別霍亂菌株和非霍亂弧菌。然后根據(jù)TcpA基因的不同DNA序列來區(qū)別古典生物型和埃爾托生物型霍亂弧菌。4小時內(nèi)可獲結(jié)果，可檢出每毫升堿性蛋白胨水中10條以下霍亂弧菌。

診斷要點

依據(jù)患者的流行病學史、臨床表現(xiàn)及實驗室檢測結(jié)果進行綜合判斷。

一、流行病學史是指：

1、生活在霍亂流行區(qū)、或5d內(nèi)到過霍亂流行區(qū)、或發(fā)病前5天內(nèi)有飲用生水或進食海（水）產(chǎn)品或其他不潔食物和飲料史。

2、與霍亂患者或帶菌者有密切接觸史或共同暴露史。

二、帶菌者：無霍亂臨床表現(xiàn)，但糞便、嘔吐物或肛拭子細菌培養(yǎng)分離到O1群和或O139群霍亂弧菌。

三、疑似病例：

1、與霍亂患者或帶菌者有密切接觸史或共同暴露史，并出現(xiàn)霍亂輕癥病例臨床表現(xiàn)者。

2、具備霍亂輕癥病例臨床表現(xiàn)并且糞便、嘔吐物或肛拭子標本霍亂毒素基因PCR檢測陽性

3、具備霍亂輕癥病例臨床表現(xiàn)并且糞便、嘔吐物或肛拭子標本霍亂弧菌快速輔助檢測試驗（膠體金快速檢測）陽性

4、具備中毒型病例臨床表現(xiàn)并且糞便、嘔吐物或肛拭子標本霍亂毒素基因PCR檢測陽性

5、具備中毒型病例臨床表現(xiàn)并且糞便、嘔吐物或肛拭子標本霍亂弧菌快速輔助檢測試驗（膠體金快速檢測）陽性

6、具備中、重型病例臨床表現(xiàn)者

四、臨床診斷病例

1、具備各型霍亂臨床表現(xiàn)之一，并且在腹瀉病患者日常生活用品或家居環(huán)境中檢出O1群和或O139群霍亂弧菌。

2、在一起確認的霍亂暴發(fā)疫情中，暴露人群中出現(xiàn)任一型霍亂臨床表現(xiàn)者。

五、確診病例

1、具備任一型霍亂臨床表現(xiàn)，并且糞便、嘔吐物或肛拭子細菌培養(yǎng)分離到O1群和或O139群霍亂弧菌

2、在疫源檢索中，糞便培養(yǎng)檢出O1群和或O139群霍亂弧菌前后各5天內(nèi)有腹瀉癥狀者。

鑒別診斷

常見的鑒別診斷如下。

一、急性胃腸炎：包括產(chǎn)腸毒素的副溶血性弧菌（致病性嗜鹽菌）、O139群以外的非O1群霍亂弧菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、梭狀桿菌等，均可引起食物中毒性感染。多數(shù)有食用不潔食物史，同餐者往往集體發(fā)病，起病急驟，早期常有發(fā)熱和其他中毒癥狀。先有嘔吐而后腹瀉，排便前往往有腸鳴、陣發(fā)性腹部劇痛，大便不是米泔樣，常為水樣或類似痢疾樣膿血便，個別重型患者大便可有清水樣或洗肉水樣（特別是副溶血性弧菌所致者），很少發(fā)生肌肉痙攣、虛脫和高氮質(zhì)血癥。

二、急性細菌性痢疾：痢疾桿菌侵襲腸黏膜，引起腸黏膜炎癥及潰瘍，并由此排出炎性滲出物，臨床上常見有發(fā)熱，大便為黏液、膿血便，量少，有腹痛及里急后重。大便鏡檢有大量的膿細胞。也有以水瀉為主、里急后重不明顯的不典型患者。大便培養(yǎng)痢疾桿菌陽性。

三、大腸桿菌性腸炎：

1．產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌（ETEC）性腸炎，潛伏期4～24小時，有發(fā)熱、惡心嘔吐及腹部絞痛，腹瀉每日10次左右，黃水或清水樣便，無膿血便，嚴重腹瀉者亦可產(chǎn)生重度脫水，嬰幼患兒常因此而危及生命。

2．腸致病性大腸桿菌（EPEC）性腸炎，大便為水樣或蛋花湯樣，重者也會有脫水及全身癥狀。

兩者糞便培養(yǎng)均可獲得相應(yīng)的大腸桿菌。

四、鼠傷寒沙門氏菌感染：侵犯各年齡組，6個月以內(nèi)嬰兒易罹患，新生兒發(fā)病尤為嚴重，多發(fā)生于5～8月份，可有發(fā)熱、腹瀉或敗血癥，腹瀉每日2～20次，大便為稀水便，亦可有膿血便，常引起不同程度脫水，大便培養(yǎng)可獲得鼠傷寒沙門氏菌。

五、空腸彎曲菌腸炎：本菌可侵襲空腸及結(jié)腸引起病變。現(xiàn)已證實本菌亦可產(chǎn)生腸毒素而致病，潛伏期3～5日，起病初期有發(fā)熱或有乏力、頭痛及肌痛等癥狀，繼而腹痛腹瀉，大便為水樣、黏液狀、膽汁樣或呈血性。嚴重病例可有重度脫水及循環(huán)衰竭。個別患者還可表現(xiàn)為急腹癥。一般典型病例不難與霍亂鑒別，大便培養(yǎng)可有彎曲菌陽性。

六、耶爾森氏菌、氣單胞菌及其他寄生蟲性腸炎：有時也需與之進行鑒別。

七、病毒性腸炎：常見病原為人輪狀病毒，侵犯各年齡組，多見于嬰幼兒，好發(fā)于秋冬季，可呈流行性。