毒理試驗(yàn)

1、最大耐受量測定試驗(yàn)

用法用量：每只小鼠按0.4ml/10g灌服25%濃度護(hù)肝片，一日內(nèi)連續(xù)灌服3次，每隔4小時(shí)1次。

結(jié) 果：小鼠一日內(nèi)連續(xù)3次灌服護(hù)肝片，最大耐受量為30g/kg提取物，約相當(dāng)于臨床或成人用量的357倍（成人每次服4片，一日3次，全天總用量為12片，即0.35g×12片=4.2g/成人）。

結(jié) 論：經(jīng)小鼠最大耐受量測定證明，認(rèn)為護(hù)肝片臨床口服用藥較安全。

2、長期毒性試驗(yàn)

用法用量：護(hù)肝片高劑量組-大鼠按5g/kg灌服護(hù)肝片（內(nèi)含提取物3.57克）；護(hù)肝片低劑量組-大鼠按2g/kg灌服護(hù)肝片（內(nèi)含提取物1.43克）。

結(jié) 果：

1）對一般情況的影響：試驗(yàn)結(jié)果表明，按上述劑量給藥，連續(xù)60天，大鼠在給藥期間，體重、行為活動(dòng)、飲食均為正常，毛具有光澤，無稀便等。

2）對紅細(xì)胞、血紅蛋白的影響：按上述劑量給大鼠連續(xù)灌服60天，對雌雄大鼠的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及血紅蛋白均無明顯的影響。

3）對白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及嗜中性粒細(xì)胞的影響：結(jié)果證明，按上述劑量給大鼠連續(xù)灌服60天，對雌雄大鼠的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞均無明顯的影響。

4）對肝、腎功能的影響：血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測定采用比色法，血清尿素氮的測定采用二乙酰一肟有顯色法，結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理證明，各給藥組對大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶均有明顯的降低作用（P<0.05），但各組的值均在大鼠的正常值范圍之內(nèi)，各給藥組對大鼠尿素氮均無明顯影響。

5）對血清總蛋白、白蛋白的影響：血清總蛋白的測定采用雙縮脲法，血清白蛋白測定采用溴甲酚綠法，結(jié)果證明，按上述劑量給大鼠連續(xù)灌服60天，對雌雄大鼠的血清總蛋白、白蛋白均無明顯影響。

6）對重要器官系數(shù)的影響：將各組大鼠處死后，分別稱心、肝、脾、肺、腎及睪丸的重量，并求出每只大鼠的重要器官系數(shù)，最后經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，結(jié)果證明，護(hù)肝片按上述劑量給大鼠連續(xù)灌服60天，對雌雄大鼠的重要器官系數(shù)均無明顯影響。

7）對重要臟器的病理檢查：將上述各組大鼠取血后，處死，分別取出各重要臟器，取材，進(jìn)行常規(guī)固定、切片、HE染色，在顯微鏡下觀察心、肝、脾、肺、腎、睪丸及卵巢組織是否有病理改變，結(jié)果如下：

心臟：心肌細(xì)胞、心內(nèi)膜、心肌內(nèi)結(jié)締組織和毛細(xì)血管均無異常改變。

肝臟：肝細(xì)胞、肝小葉及小葉間結(jié)構(gòu)無異常改變。

脾臟：紅髓、白髓內(nèi)細(xì)胞和組織結(jié)構(gòu)均無異常改變。

肺臟：各級支氣管組織和上皮組織均未見異常，肺泡、肺泡囊、肺泡壁亦未見形態(tài)學(xué)改變。

腎臟：腎小球、腎小管及各種小管上皮均未見異常改變。

睪丸：細(xì)精管內(nèi)各級精母細(xì)胞可見，成熟精子細(xì)胞及精子大量存在。

卵巢：組織結(jié)構(gòu)和各種卵泡未見異常改變。

上述結(jié)果證明，護(hù)肝片連續(xù)給大鼠口服，對重要臟器無明顯的病理改變。

結(jié) 論：

上述長期毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，護(hù)肝片按5g/kg（內(nèi)含提取物3.57克），2g/kg（內(nèi)含提取物1.43克）給大鼠連續(xù)灌服60天，對大鼠體重、紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞、白細(xì)胞分類均無明顯影響；對血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、尿素氮、總蛋白、白蛋白、重要器官系數(shù)均無明顯改變；對重要臟器心、肝、脾、肺、腎、睪丸、卵巢經(jīng)鏡下觀察無病理改變。根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，認(rèn)為該藥口服用藥無明顯的毒性反應(yīng)。