毒理試驗

1、最大耐受量測定試驗

用法用量：每只小鼠按0.4ml/10g灌服25%濃度護肝片，一日內連續(xù)灌服3次，每隔4小時1次。

結 果：小鼠一日內連續(xù)3次灌服護肝片，最大耐受量為30g/kg提取物，約相當于臨床或成人用量的357倍（成人每次服4片，一日3次，全天總用量為12片，即0.35g×12片=4.2g/成人）。

結 論：經(jīng)小鼠最大耐受量測定證明，認為護肝片臨床口服用藥較安全。

2、長期毒性試驗

用法用量：護肝片高劑量組-大鼠按5g/kg灌服護肝片（內含提取物3.57克）；護肝片低劑量組-大鼠按2g/kg灌服護肝片（內含提取物1.43克）。

結 果：

1）對一般情況的影響：試驗結果表明，按上述劑量給藥，連續(xù)60天，大鼠在給藥期間，體重、行為活動、飲食均為正常，毛具有光澤，無稀便等。

2）對紅細胞、血紅蛋白的影響：按上述劑量給大鼠連續(xù)灌服60天，對雌雄大鼠的紅細胞計數(shù)及血紅蛋白均無明顯的影響。

3）對白細胞、淋巴細胞及嗜中性粒細胞的影響：結果證明，按上述劑量給大鼠連續(xù)灌服60天，對雌雄大鼠的白細胞計數(shù)、淋巴細胞、嗜中性粒細胞均無明顯的影響。

4）對肝、腎功能的影響：血清谷丙轉氨酶的測定采用比色法，血清尿素氮的測定采用二乙酰一肟有顯色法，結果經(jīng)統(tǒng)計學處理證明，各給藥組對大鼠血清谷丙轉氨酶均有明顯的降低作用（P<0.05），但各組的值均在大鼠的正常值范圍之內，各給藥組對大鼠尿素氮均無明顯影響。

5）對血清總蛋白、白蛋白的影響：血清總蛋白的測定采用雙縮脲法，血清白蛋白測定采用溴甲酚綠法，結果證明，按上述劑量給大鼠連續(xù)灌服60天，對雌雄大鼠的血清總蛋白、白蛋白均無明顯影響。

6）對重要器官系數(shù)的影響：將各組大鼠處死后，分別稱心、肝、脾、肺、腎及睪丸的重量，并求出每只大鼠的重要器官系數(shù)，最后經(jīng)統(tǒng)計學處理，結果證明，護肝片按上述劑量給大鼠連續(xù)灌服60天，對雌雄大鼠的重要器官系數(shù)均無明顯影響。

7）對重要臟器的病理檢查：將上述各組大鼠取血后，處死，分別取出各重要臟器，取材，進行常規(guī)固定、切片、HE染色，在顯微鏡下觀察心、肝、脾、肺、腎、睪丸及卵巢組織是否有病理改變，結果如下：

心臟：心肌細胞、心內膜、心肌內結締組織和毛細血管均無異常改變。

肝臟：肝細胞、肝小葉及小葉間結構無異常改變。

脾臟：紅髓、白髓內細胞和組織結構均無異常改變。

肺臟：各級支氣管組織和上皮組織均未見異常，肺泡、肺泡囊、肺泡壁亦未見形態(tài)學改變。

腎臟：腎小球、腎小管及各種小管上皮均未見異常改變。

睪丸：細精管內各級精母細胞可見，成熟精子細胞及精子大量存在。

卵巢：組織結構和各種卵泡未見異常改變。

上述結果證明，護肝片連續(xù)給大鼠口服，對重要臟器無明顯的病理改變。

結 論：

上述長期毒性實驗結果表明，護肝片按5g/kg（內含提取物3.57克），2g/kg（內含提取物1.43克）給大鼠連續(xù)灌服60天，對大鼠體重、紅細胞、血紅蛋白、白細胞、白細胞分類均無明顯影響；對血清谷丙轉氨酶、尿素氮、總蛋白、白蛋白、重要器官系數(shù)均無明顯改變；對重要臟器心、肝、脾、肺、腎、睪丸、卵巢經(jīng)鏡下觀察無病理改變。根據(jù)上述實驗結果，認為該藥口服用藥無明顯的毒性反應。