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免疫診斷試劑使用注意事項(xiàng)

2013-11-17 09:57 來(lái)源:
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免疫診斷試劑使用注意事項(xiàng)是檢驗(yàn)技士考試復(fù)習(xí)需要了解的知識(shí),醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜索整理如下:

一、試劑準(zhǔn)備

1)試驗(yàn)前將所需試劑盒組分在室溫或37℃平衡30分鐘;

2)試劑盒及其組分的保存按試劑盒操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行;

3)保存試劑盒的冰箱應(yīng)經(jīng)常檢查儲(chǔ)存溫度并作好記錄;

4)保存試劑盒的冰箱應(yīng)避免頻繁開(kāi)關(guān)。

二、標(biāo)本準(zhǔn)備

1)抽血時(shí),應(yīng)盡量避免溶血;

2)非抗凝血自然凝固1-2小時(shí)后,3000rpm離心15分鐘以制備血清標(biāo)本;

3)用含有抗凝劑的采血管采血后,應(yīng)立即顛倒混合5-10次并放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘以制備血漿標(biāo)本;

4)標(biāo)本若在五天內(nèi)檢測(cè),應(yīng)在2-8℃冰箱中保存,標(biāo)本若需長(zhǎng)期貯存,應(yīng)于-20℃中密封保存,長(zhǎng)期貯存的標(biāo)本應(yīng)為血清或血漿;

5)用于ELISA一步法檢測(cè)的標(biāo)本,不能使用NAN3防腐;6)標(biāo)本如需稀釋,請(qǐng)用人血清或小牛血清稀釋(說(shuō)明書(shū)有指明的除外)。

三、加樣

1)加樣應(yīng)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)中所規(guī)定的量和順序進(jìn)行;

2)加樣時(shí)應(yīng)將標(biāo)本加在微孔反應(yīng)板底部;

3)如不慎將樣本或試劑濺出孔外時(shí),應(yīng)用吸水紙輕拭吸干,并做好記錄;

4)手工操作時(shí),微孔反應(yīng)板加樣后應(yīng)及時(shí)溫育;

5)標(biāo)本加樣過(guò)多時(shí)應(yīng)分批操作,以免加樣后溫育前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。

四、溫育

1)測(cè)量溫度應(yīng)使用校準(zhǔn)過(guò)的水銀溫度計(jì);

2)溫育容器的溫度應(yīng)恒定為37℃;

3)如果使用恒溫箱溫育時(shí),除保證恒溫箱內(nèi)溫度為37℃外,還應(yīng)注意盡量少開(kāi)啟恒溫箱門;溫育時(shí)微孔板不要疊加;

4)微孔板不要置室溫溫育;

5)嚴(yán)格按試劑盒操作說(shuō)明書(shū)控制溫育時(shí)間,不能人為延長(zhǎng)或縮短溫育時(shí)間;

6)微孔反應(yīng)板溫育時(shí)要加貼封片,這樣可以防止孔內(nèi)液體成分蒸發(fā)或水珠等雜質(zhì)滴入孔內(nèi)影響檢測(cè)結(jié)果;封片不能重復(fù)使用。

五、洗板

1)配置洗滌液需要新鮮、干凈,且無(wú)細(xì)菌污染的蒸餾水或去離子水,洗滌液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配;

2)盛放洗滌液的塑料容器應(yīng)經(jīng)常使用清洗劑徹底清洗,清洗干凈后的容器方可使用;

3)洗板時(shí)應(yīng)保證洗滌液注滿微孔反應(yīng)板的每個(gè)孔,洗完板后將微孔反應(yīng)板在吸水板上輕輕拍干;

4)為保證洗板前洗板針的暢通,應(yīng)經(jīng)常用細(xì)針清除掉洗板針內(nèi)積存的纖維蛋白等雜質(zhì);

5)使用洗板機(jī)洗板時(shí),合理安排洗板時(shí)間和洗板間隔,避免因反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng);

6)微孔反應(yīng)板洗板次數(shù)要保持一致,不能過(guò)多或過(guò)少;

7)如果微孔反應(yīng)板需要拼接于板架上,必須確保板條放平,以免影響洗板機(jī)操作而造成洗板不徹底。

六、顯色

1)OPD顯色劑要在使用前配制,不能使用過(guò)期顯色劑;請(qǐng)勿使用肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑;

2)添加顯色劑時(shí),注意不能濺出孔外;

3)顯色劑應(yīng)避免接觸金屬器械。

七、終止加終止液應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡,以免比色時(shí)結(jié)果不準(zhǔn)確。

八、結(jié)果判讀

1)酶標(biāo)儀讀數(shù)時(shí),應(yīng)保證微孔反應(yīng)板底部清潔;

2)按說(shuō)明書(shū)的規(guī)定進(jìn)行讀數(shù)和結(jié)果判讀。

九、全過(guò)程ELISA實(shí)驗(yàn)的整個(gè)操作過(guò)程中保證微孔反應(yīng)板不接觸次氯酸。

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