過敏患者的血清中存在著具有變應(yīng)原特異性的IgE稱之為特異性IgE,如對牛奶過敏者則有針對牛奶變應(yīng)原的IgE;對蒿草花粉過敏者,則有針對該花粉的IgE,該抗體只能與該變應(yīng)原特異性結(jié)合。因此需要用純化的變應(yīng)原代替抗IgE進(jìn)行檢測。
sIgE檢測方法有許多種,目前臨床上常用的有ELISA,F(xiàn)EIA,免疫印跡等。隨著sIgE測定技術(shù)的完善,此項(xiàng)測定已日趨商品化,開發(fā)了各種檢測系統(tǒng),如CAP過敏原檢測系統(tǒng),Master過敏原檢測系統(tǒng),Px過敏原檢測系統(tǒng)等,這些測定系統(tǒng)包括了儀器、試劑、計(jì)算機(jī)軟件處理系統(tǒng)。國內(nèi)目前應(yīng)用最多的是CAP檢測系統(tǒng)。
1.放射變應(yīng)原吸附試驗(yàn)(RAST):將純化的變應(yīng)原與固相載體結(jié)合,加入待檢血清及參考對照,再與同位素標(biāo)記的抗IgE抗體反應(yīng),然后測定固相的放射活性,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出待檢血清中特異性IgE的含量,或在標(biāo)本放射活性高于正常人均數(shù)加3s時(shí)判為陽性醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。
2.酶聯(lián)免疫測定法試驗(yàn):原理及步驟基本同RAST,僅是最后加入酶標(biāo)記的抗IgE,利用酶底物進(jìn)行顯色。測定結(jié)果的表示也與RAST相同。
3.CAP檢測系統(tǒng):CAP,一個(gè)很小的塑料帽狀物,其內(nèi)置有多孔性、彈性和親水性的纖維素粒,此粒多孔,吸咐了更多的變應(yīng)原,加人血清,血清中的sIgE就會(huì)和變應(yīng)原結(jié)合,再加入酶標(biāo)抗人IgE,再加入熒光顯色系統(tǒng),在熒光分光光度計(jì)上測定熒光強(qiáng)度,計(jì)算機(jī)提供相應(yīng)軟件,自動(dòng)計(jì)算出結(jié)果。報(bào)告sIgE含量。
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