摘 要:目的探討黑色素瘤細(xì)胞OCM-1A中表觀遺傳因素DNA甲基化對HLA-G分子表達(dá)的影響。
方法 利用DNA甲基化抑制劑5-aza-2‘-deoxycytidine(ADC)處理HLA-G陰性黑色素瘤細(xì)胞OCM-1A,檢測經(jīng)不同濃度、不同時間的ADC處理后HLA-G基因及蛋白表達(dá)的變化。序列測定分析ADC處理前后HLA-G基因啟動子區(qū)220bp片段的甲基化水平,RT-PCR檢測HLA-GmRNA水平的變化,Western blot檢測細(xì)胞HLA-G分子合成總量以及FACS檢測細(xì)胞表面HLA-G分子的表達(dá)水平。
結(jié)果 HLA-G陰性黑色素瘤細(xì)胞OCM-1A經(jīng)ADC處理后,HLA-G基因啟動子區(qū)的CpG甲基化程度明顯降低,誘導(dǎo)HLA-G基因轉(zhuǎn)錄,HLA-G分子獲得表達(dá)。HLA-G基因及蛋白的表達(dá)水平與處理時間相關(guān),隨著處理時間的延長,HLA-G表達(dá)量上升。
結(jié)論 OCM-1A細(xì)胞中,HLA-G基因的表達(dá)調(diào)控受DNA甲基化影響,ADC對HLA-G的表達(dá)調(diào)控具有時相性。