摘 要:目的克隆中國(guó)旱獺α干擾素(IFN-α)家族基因,以期利用克隆的中國(guó)旱獺家族IFN-α在動(dòng)物模型上探索慢性乙型肝炎有效的干擾素治療方案和策略。
方法 利用分子克隆技術(shù)對(duì)中國(guó)旱獺IFN-α家族基因進(jìn)行克隆,并對(duì)所克隆的系列基因進(jìn)行測(cè)序、分型、系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)分析、同源性比較及理化特性分析。
結(jié)果 從112個(gè)中國(guó)旱獺IFN-α基因克隆中獲得18個(gè)獨(dú)立的不重復(fù)序列,其中的14個(gè)序列來(lái)自4次以上相對(duì)獨(dú)立的PCR產(chǎn)物,將它們分為14個(gè)基因亞型,其中8個(gè)是功能基因亞型,6個(gè)是假基因亞型。中國(guó)旱獺IFN-α各基因亞型之間在核苷酸水平和氨基酸水平有很高的同源性,平均分別為93%和85%,前體蛋白N端含23個(gè)氨基酸的疏水性信號(hào)肽。
結(jié)論 中國(guó)旱獺IFN-α家族至少有14個(gè)基因亞型,這些基因的克隆可能應(yīng)用于中國(guó)旱獺HBV動(dòng)物感染模型,進(jìn)行干擾素基因治療和研究干擾素治療策略。