摘 要:目的觀察呼吸道合胞病毒(RSV)對(duì)致敏小鼠氣道炎癥和CD8+T細(xì)胞功能的影響。
方法 BALB/c小鼠40只,隨機(jī)分成4組,分別為磷酸鹽緩沖液(PBS)對(duì)照組、雞卵白蛋白(OVA)組、RSV組、OVA/RSV組;應(yīng)用OVA腹腔注射致敏、OVA氣道霧化結(jié)合RSV滴鼻激發(fā)哮喘;支氣管肺泡灌洗液(BALF)作細(xì)胞分類計(jì)數(shù);酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定BALF上清中白細(xì)胞介素(IL)-4、IL-5、干擾素(IFN)-γ含量;蘇木精-依紅(HE)染色觀察肺病理變化;采用三色光流式細(xì)胞分析法測(cè)定氣管旁淋巴結(jié)(PBLN)中CD4+、CD8+T細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4、IL-5表達(dá)與TH2/TH1、Tc2/Tc1比值變化。
結(jié)果(1)BALF中細(xì)胞總數(shù)及分類:與OVA組比較,OVA/RSV組細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞均明顯增加(分別P<0.01);與RSV組比較,OVA/RSV組細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞明顯增加(分別P<0.01)。(2)BALF上清中細(xì)胞因子含量:與OVA組比較,OVA/RSV組IFN-γ、IL-4、IL-5含量均明顯升高(分別P<0.01);與RSV組比較,OVA/RSV組IFN-γ無明顯變化,而IL-4、IL-5顯著上升(分別P<0.01)。(3)肺組織病理:OVA/RSV組與其他各組比較氣道黏膜增厚,管腔狹窄、收縮,上皮破壞,管壁周圍炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)明顯加重。(4)PBLN中CD4+(WN-γ+、IL-4+、IL-5+)、CD8+(IFN-γ+、IL-4+、IL-5+)T細(xì)胞各占CD3+T細(xì)胞百分比及TH2/TH1、Tc2/Tc1比值變化:與OVA組比較,OVA/RSV組CD8+(IFN-γ+、IL-4+、IL-05+)T細(xì)胞百分比、Tc2/Tc1比值增加(分別P<0.01),TH2/TH1比值無明顯變化。與RSV組比較,OVA/RSV組CD4+(IL-4+、IL-5+)T細(xì)胞、TH2/TH1比值、CD8+(IL-4+、IL-5+)T細(xì)胞、Tc2/Tc1比值均明顯上升(分別P<0.01)。
結(jié)論(1)OVA致敏小鼠RSV感染后可明顯加重氣道炎癥,TH2、TH1型炎癥均加強(qiáng),且以TH2型炎癥加重為主。(2)OVA致敏小鼠RSV感染后可引起CD8+T細(xì)胞數(shù)量及功能改變,即由產(chǎn)生IFN-γ+為特征的Tc1細(xì)胞向產(chǎn)生IL-4+、IL-5+為特征Tc2細(xì)胞轉(zhuǎn)化,并可能與氣道內(nèi)IL-4、IL-5升高及嗜酸性粒細(xì)胞的大量募集有關(guān)。